ICS13.300 CCSA80 中华人民共和国国家标准 GB/T21772—2025 代替GB/T21772—2008 化学品 哺乳动物骨髓染色体畸变 试验方法 Chemicals—Testmethodofmammalianbonemarrowchromosomeaberration 2025-10-05发布 2026-02-01实施 国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会发布目 次 前言 Ⅲ ………………………………………………………………………………………………………… 引言 Ⅳ ………………………………………………………………………………………………………… 1 范围 1 ……………………………………………………………………………………………………… 2 规范性引用文件 1 ………………………………………………………………………………………… 3 术语和定义 1 ……………………………………………………………………………………………… 4 缩略语 2 …………………………………………………………………………………………………… 5 试验基本原则 2 …………………………………………………………………………………………… 6 试验方法 2 ………………………………………………………………………………………………… 7 试验数据和报告 5 ………………………………………………………………………………………… 参考文献 8 ……………………………………………………………………………………………………… ⅠGB/T21772—2025 前 言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件代替GB/T21772—2008《化学品 哺乳动物骨髓染色体畸变试验方法》,与GB/T21772—2008 相比,除结构调整和编辑性改动外,主要技术变化如下: a) 增加了“有丝分裂指数”的术语和定义(见3.5); b) 增加了“缩略语”一章(见第4章); c) 更改了“染色体型畸变”“染色单体型畸变”“内复制”“多倍体”和“结构畸变”的定义(见3.1、 3.2、3.3、3.7和3.8,2008年版的2.1、2.2、2.3、2.6和2.7); d) 更改了试验动物饲养环境的温度和湿度范围(见6.1.2,2008年版的4.1.2); e) 增加了动物每笼饲养只数的要求和具体的动物标记方法(见6.1.2、6.1.3); f) 增加了不同类型受试物的染毒途径(见6.1.4.1); g) 增加了常见的溶剂/赋形剂具体名称可供选择(见6.2.1); h) 更改了环磷酰胺和环磷酰胺(一水合物)的名称及CAS号(见6.2.2.3,2008年版的4.2.2.2),并 增加了甲磺酸甲酯名称及CAS号(见6.2.2.3); i) 更改了灌胃及注射染毒的最大体积(见6.3.4.3,2008年版的4.3.5); j) 增加了对涂片标记的要求(见6.3.8.1); k) 增加了“观察”部分(见6.3.6); l) 增加了染色体制备的具体方法(见6.3.7); m) 更改了“试验报告”,对试验报告应包括的各项内容做了更为详细的规定(见7.3,2008年版的 5.3)。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由全国危险化学品管理标准化技术委员会(SAC/TC251)提出并归口。 本文件起草单位:中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所、青岛大学、生态环境部固体废物 与化学品管理技术中心。 本文件主要起草人:于典科、许琳、李斌、马燕、杨力、陈宵、靳远、赵坤明。 本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为: ———2008年首次发布为GB/T21772—2008; ———本次为第一次修订。 ⅢGB/T21772—2025 引 言 本试验用于检测和评价受试物诱发啮齿类动物骨髓染色体结构畸变作用。染色体结构畸变可有 两种形式,即染色体型畸变和染色单体型畸变。多倍体增加可能表明受试物有导致染色体数目畸变的 潜在作用。大多数化学致突变物诱发的染色体畸变是染色单体型畸变,但染色体型畸变也可发生染色 体突变及其相关事件是很多人类遗传性疾病的原因,并且有充分的证据表明,引起癌基因和肿瘤抑制基 因改变的染色体畸变及其相关事件与人类和试验动物的癌症发生有关。 本试验常规使用啮齿类动物。骨髓是本试验的靶器官,因其富含血管,且有大量易于分离和处理的 快速循环的细胞。其他种属和靶器官不是本试验的对象。 染色体畸变试验特别适合评价那些需要考虑体内代谢、药物代谢动力学和DNA-修复过程等因素 导致的遗传毒性,尽管上述因素在不同动物种属、不同组织之间可能存在差异。体内试验对用于进一步 研究在体外试验中检测到的遗传毒性。 如果有证据表明受试物或其活性代谢产物不能到达到靶器官,则不适合使用本试验。 ⅣGB/T21772—2025 化学品 哺乳动物骨髓染色体畸变 试验方法 1 范围 本文件描述了哺乳动物骨髓染色体畸变试验的试验方法。 本文件适用于哺乳动物骨髓染色体畸变试验。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB14925—2023 实验动物 环境及设施 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 染色体型畸变 chromosome-typeaberration 染色单体断裂或染色单体间断裂和重接的染色体结构损伤的现象。 3.2 染色单体型畸变 chromatid-typeaberration 两条染色单体在相同位点的断裂或断裂重接的染色体结构损伤的现象。 3.3 内复制 endoreduplication 在DNA复制的S期之后,细胞核未进行有丝分裂就开始了另一个S期的过程。 注:其结果是染色体有4、8、16等倍的染色质。 3.4 裂隙 gap 小于染色单体宽度的不着色的损伤,并伴有染色单体极小的错位。 3.5 有丝分裂指数 mitoticindex 有丝分裂的细胞数量与总细胞数量之比。 注:用来衡量增殖状态细胞数量的指标。 3.6 数目畸变 numericalaberration 染色体数目的改变,不同于所用细胞的正常染色体数目。 3.7 多倍体 polyploidy 有两套以上染色体组的细胞或个体。 1GB/T21772—2025 3.8 结构畸变 structureaberration 细胞分裂中期的染色体结构改变现象。 注:显微镜下可观察到结构畸变如缺失、断裂、内交换或者相互交换等。 4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 CAS:化学文摘社编号(ChemicalAbstractsService) InChI:国际化合物标识(InternationalChemicalIdentifier) IUPAC:国际纯粹与应用化学联合会(InternationalUnionofPureandAppliedChemistry) SMILES:简化分子线性输入规范(Simplifiedmolecularinputlineentrysystem) UVCB:组分未知或者可变的物质、复杂反应产物或者生物材料(substancesofUnknownor Variablecomposition,ComplexreactionproductsorBiologicalmaterials) 5 试验基本原则 试验动物通过合适的染毒途径接触受试物,并在染毒后适当的时间进行安乐死。在安乐死前,动物 用细胞中期分裂相阻断剂(如秋水仙碱或秋水仙素)处理,然后取骨髓细胞进行染色体制备、染色,分析 中期分裂相细胞的染色体畸变。 6 试验方法 6.1 准备 6.1.1 动物品、系选择 宜使用健康、初成年的大鼠、小鼠和中国仓鼠,但也可用其他合适的哺乳动物。在试验之初,动物体 重变异应不超过同性别平均体重的±20%。 6.1.2 饲养条件 试验动物房环境应符合GB14925—2023中6.1的规定。应人工照明,12h明暗交替。饲喂常规实 验室饲料,不限饮水。如果需要以受试物掺入饲料的方式进行染毒,应保证饲料与受试物适当混合。动 物应以小群饲养(每笼不多于5只),并以同性一起饲养。应在有科学依据的情况下,进行动物单独 饲养。 6.1.3 动物的准备 将健康的初成年鼠(对于啮齿动物,宜为6周龄~10周龄)随机分配到对照组和染毒组。对动物进 行标记应采用人道且微创的方式(如带环、打标签、微芯片或者生物识别,不包括剪耳或剪趾)。饲养笼 应随机安排,以使可能的饲养笼放置效应减小。在实验室条件下适应性喂养至少5d。 6.1.4 受试物的准备 6.1.4.1 固体受试物在染毒前应溶解于或悬浮于合适的溶剂或赋形剂中,或混在动物的食物或饮用水 中。液体受试物可直接给药或在给药前稀释。对于吸入式暴露,受试物受理化性质影响,包括但不限于 2GB/T21772—2025