书 书 书犐犆犛 ６５ ． １２０ 犆犆犛犅 ４６ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A 犌犅 ／ 犜 ４０８３０ — ２０２１ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G28 /G29 /G2A /G2B /G2C /G2D /G2E /G2F /G30 （ /G31 /G32 犜 /G33 /G34 /G35 /G36 ） 犆狅犱犲狅犳狆狉犪犮狋犻犮犲犳狅狉狋犺犲犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犳犲犲犱狋狉狌犲犻犾犲犪犾犱犻犵犲狊狋犻犫犾犲犪犿犻狀狅犪犮犻犱狊犳狅狉狆犻犵狊 （ 犛犻犿狆犾犲犜犮犪狀狀狌犾犪狋犻狅狀 ） ２０２１  １０  １１ /G37 /G38 ２０２２  ０５  ０１ /G39 /G3A /G27 /G28 /G2B /G2C /G2D /G2E /G2F /G30 /G31 /G32 /G27 /G28 /G29 /G2A /G33 /G2F /G30 /G34 /G35 /G36 /G37 /G38书 书 书前 　　 言 　　 本文件按照 ＧＢ ／ Ｔ１．１ — ２０２０ 《 标准化工作导则 　 第 １ 部分 ： 标准化文件的结构和起草规则 》 的规定起草 。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。 本文件的发布机构不承担识别专利的责任 。 本文件由全国饲料工业标准化技术委员会 （ ＳＡＣ ／ ＴＣ７６ ） 提出并归口 。 本文件起草单位 ： 中国农业大学 、 重庆市畜牧科学院 。 本文件主要起草人 ： 曾祥芳 、 谯仕彦 、 杨飞云 、 王钰明 、 李培丽 、 周俊言 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ４０８３０ — ２０２１ 猪饲料真可消化氨基酸测定技术规程 （ 简单 犜 型瘘管法 ） １ 　 范围 本文件规定了简单 Ｔ 型瘘管法测定猪饲料真可消化氨基酸的原理 、 试验方法 、 结果计算与统计分析和试验报告 。 本文件适用于猪饲料原料和饲料产品的真可消化氨基酸的测定 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款 。 其中 ， 注日期的引用文 件 ， 仅该日期对应的版本适用于本文件 ； 不注日期的引用文件 ， 其最新版本 （ 包括所有的修改单 ） 适用于本文件 。 ＧＢ ／ Ｔ６４３５ 　 饲料中水分的测定 ＧＢ ／ Ｔ１３０８８ 　 饲料中铬的测定 ＧＢ ／ Ｔ１５３９９ 　 饲料中含硫氨基酸的测定 　 离子交换色谱法 ＧＢ ／ Ｔ１５４００ 　 饲料中色氨酸的测定 ＧＢ ／ Ｔ１８２４６ 　 饲料中氨基酸的测定 ＧＢ ／ Ｔ３９２３５ — ２０２０ 　 猪营养需要量 ３ 　 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 。 ３ ． １ 标准回肠可消化氨基酸 　 狊狋犪狀犱犪狉犱犻狕犲犱犻犾犲犪犾犱犻犵犲狊狋犻犫犾犲犪犿犻狀狅犪犮犻犱狊 饲粮氨基酸摄入量与回肠末端氨基酸排出量 （ 扣除应用无氮饲粮法测定的基础内源氨基酸损失 ） 的 差值 。 ３ ． ２ 真可消化氨基酸 　 狋狉狌犲犻犾犲犪犾犱犻犵犲狊狋犻犫犾犲犪犿犻狀狅犪犮犻犱狊 饲粮氨基酸摄入量与回肠末端氨基酸排出量 （ 扣除特异性和基础内源氨基酸损失 ） 的差值 。 　　 注 ： 由于特异性内源氨基酸损失没有标准方法测定 ， 国际上以标准回肠可消化氨基酸代表真可消化氨基酸 ， 因此本 文件用标准回肠可消化氨基酸的测定代表真可消化氨基酸的测定 。 ４ 　 原理 通过外科手术造瘘 ， 将 “ Ｔ ” 形的塑料套管安装在动物消化道上 ， 使其不影响动物的肠道活动 、 食欲 及生长速度 ， 并可连续收集动物消化道内容物 。 以安装有回肠末端 Ｔ 型瘘管的健康生长猪为试验动物 ， 采用无氮饲粮和指示剂测定猪饲料标准回肠可消化氨基酸 ， 即可得到猪饲料真可消化氨基酸值 。 １ 犌犅 ／ 犜 ４０８３０ — ２０２１ ５ 　 试验方法 ５ ． １ 　 试验设计 依据待测饲料样品的数量确定试验设计 ， 采用交叉设计或拉丁方设计 ， 每个待测饲料样品至少检测 ６ 个生物学重复 ， 每个重复至少 １ 头猪 。 ５ ． ２ 　 试验动物 ５ ． ２ ． １ 　 选择体重 １８ｋｇ ～ ２５ｋｇ 的杜 × 长 × 大三元杂交健康去势公猪 ， 进行免疫 、 驱虫处理后备手术用 。 其他品种宜选择保育后期的猪 。 ５ ． ２ ． ２ 　 猪回肠末端 Ｔ 型瘘管手术按附录 Ａ 的规定进行 。 ５ ． ３ 　 试验饲粮 ５ ． ３ ． １ 　 试验饲粮的要求和制备 粉料粒度应 ９９％ 通过孔径为 ２．８０ｍｍ 的编织筛 ， １．４０ｍｍ 编织筛筛上物比例不应大于 １５％ ， 筛上物中不应有整粒谷物 ； 颗粒饲料的含粉率应低于 ４．０％ ， 粉化率应低于 １０．０％ 。 试验饲粮均匀度的变异系数不应大于 ５％ 。 测试蛋白质饲料原料时 ， 应混以适量其他不含氮的原料 （ 如玉米淀粉 、 蔗糖 、 纤维和豆油等 ） 配制成半纯合饲粮 ， 将饲粮的粗蛋白质水平调整到 １５％ 左右 ， 并参照 ＧＢ ／ Ｔ３９２３５ — ２０２０ 中猪营养需要量 ， 用钙 、 磷 、 饲料级氯化钠及矿物质微量元素 、 维生素预混剂等配制成半纯合饲粮 。 半纯合饲粮中纤维含量以 ３％ ～ ５％ 为宜 。 测试能量饲料原料时 ， 适口性好的能量饲料原料以待测原料为唯一蛋白质来源 ， 参照 ＧＢ ／ Ｔ３９２３５ — ２０２０ 中猪营养需要量加入钙 、 磷 、 饲料级氯化钠及矿物质微量元素 、 维生素预混剂等 ， 饲粮中无需加入玉米淀粉 、 豆油 、 纤维等原料 。 适口性不好的能量饲料原料采用套算法 ， 混以基础饲粮 。 测试单体氨基酸或其类似物时 ， 半纯合饲粮中该氨基酸含量以生长阶段猪需要量的 １．５ 倍为宜 。 ５ ． ３ ． ２ 　 无氮饲粮的配制 无氮饲粮应由玉米淀粉 、 蔗糖 、 纯纤维素 、 饲料级氯化钠 、 矿物质微量元素和维生素预混剂等组成 （ 见附录 Ｂ ）。 无氮饲粮中微量元素和维生素含量应符合 ＧＢ ／ Ｔ３９２３５ — ２０２０ 中的推荐值 。 ５ ． ３ ． ３ 　 试验饲粮指示剂种类及含量 试验饲粮指示剂选择三氧化二铬 （ Ｃｒ ２ Ｏ ３ ）， 其添加量 ０．３％ ～ ０．５％ ； 或选择其他效果相当的指示剂 。 ５ ． ４ 　 试验期 ５ ． ４ ． １ 　 总则 待安装回肠 Ｔ 型瘘管的试验猪恢复健康开始正式试验 。 每期试验分适应期 、 预饲期和正试期 。 ５ ． ４ ． ２ 　 适应期 适应期不低于 ６ｄ 。 分别观察并记录每头试验猪待测饲粮或无氮饲粮的自由采食量 ， 作为正试期饲粮饲喂量的决策依据 。 ２ 犌犅 ／ 犜 ４０８３０ — ２０２１ ５ ． ４ ． ３ 　 预饲期 预饲期不低于 ５ｄ 。 按适应期观察到的自由采食量的 ８５％ ～ ９０％ 的量定量饲喂 。 ５ ． ４ ． ４ 　 正试期 正试期不低于 ２ｄ 。 准确定量饲喂 ， 每日 ０８ ： ００ ～ ２０ ： ００ 连续收集每头猪的回肠末端食糜 。 ５ ． ５ 　 饲养管理 ５ ． ５ ． １ 　 供试猪饲养于个体代谢笼中 ， 将每日的总采食量均分为 ２ 次饲喂 ， 时间为 ０８ ： ００ 和 １６ ： ００ ， 自由 饮水 。 ５ ． ５ ． ２ 　 猪舍温度 ２０℃ ～ ２５℃ ， 相对湿度 ８０％ ， 光照 ３０ｌｘ ～ ５０ｌｘ ， 风速 ０．４ｍ ／ ｓ ～ １．０ｍ ／ ｓ 。 ５ ． ６ 　 试验样品的采集与制备 ５ ． ６ ． １ 　 正试期每日连续收集 １２ｈ 食糜 ， 每次收集后立即放入 －２０℃ 冷冻保存 。 ５ ． ６ ． ２ 　 食糜常温解冻 ， 各头猪每期食糜经充分混合后取样 ， 并在冷冻干燥机中冻干 ， 置室温下回潮 ２４ｈ ， 称重 、 记录 、 粉碎备用 。 ５ ． ６ ． ３ 　 取样编号 ， 密封保存 ， 测定样品干物质 、 氨基酸和指示剂含量 。 ５ ． ７ 　 试验样品分析 样品中水分按照 ＧＢ ／ Ｔ６４３５ 测定 ， 并计算其干物质含量 ； 铬的含量按照 ＧＢ ／ Ｔ１３０８８ 测定 ； 含硫氨 基酸的含量按照 ＧＢ ／ Ｔ１５３９９ 测定 ； 色氨酸的含量按照 ＧＢ ／ Ｔ１５４００ 测定 ； 其他氨基酸的含量按照 ＧＢ ／ Ｔ１８２４６ 测定 。 ６ 　 结果计算与统计分析 ６ ． １ 　 试验饲粮标准回肠可消化氨基酸结果计算 ６ ． １ ． １ 　 表观回肠氨基酸消化率 试样表观回肠氨基酸消化率按公式 （ １ ） 计算 ： 狑 ＡＩＤ ＝ １ － 犃犃 １ 犃犃 ２ × 犐犕 ２ 犐犕 １ （ ） × １００ …………………………（ １ ） 　　 式中 ： 狑 ＡＩＤ ——— 试样表观回肠氨基酸消化率 ， ％ ； 犃犃 １ ——— 回肠食糜中氨基酸含量 （ 以干物质计 ）， 单位为克每千克 （ ｇ ／ ｋｇ ）； 犃犃 ２ ——— 待测饲粮中氨基酸含量 （ 以干物质计 ）， 单位为克每千克 （ ｇ ／ ｋｇ ）； 犐犕 ２ ——— 待测饲粮中指示剂含量 （ 以干物质计 ）， 单位为克每千克 （ ｇ ／ ｋｇ ）； 犐犕 １ ——— 回肠食糜中指示剂含量 （ 以干物质计 ）， 单位为克每千克 （ ｇ ／ ｋｇ ）。 ６ ． １ ． ２ 　 基础回肠内源氨基酸损失 试样基础回肠内源氨基酸损失按公式 （ ２ ） 计算 ： 狑 ＢＩＡＡ ＝ 犃犃 ３ × 犐犕 ４ 犐犕 ３ …………………………（ ２ ） ３ 犌犅 ／ 犜 ４０８３