书 书 书犐犆犛 ７１ ． １００ ． ７０ 犢 ４２ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A 犌犅 ／ 犜 ３９９９９ — ２０２１ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G28 /G29 １５ /G2A /G2B /G2C /G2D /G26 /G2E /G2F /G30 /G31 /G32 /G33 /G34 /G35 　 /G36 /G37 /G38 /G39  /G3A /G3B /G3C /G39 /G3D 犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳 １５ 犽犻狀犱狊狅犳狆狉狅犺犻犫犻狋犲犱狇狌犻狀狅犾狅狀犲狋狔狆犲犪狀狋犻犫犻狅狋犻犮狊犻狀犮狅狊犿犲狋犻犮狊犻狀犮犾狌犱犻狀犵犲狀狉狅犳犾狅狓犪犮犻狀 — 犔犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔狋犪狀犱犲犿犿犪狊狊狊狆犲犮狋狉狅犿犲狋狉狔 ２０２１  ０４  ３０ /G3E /G3F ２０２１  １１  ０１ /G40 /G41 /G27 /G28 /G2B /G2C /G2D /G2E /G2F /G30 /G31 /G32 /G27 /G28 /G29 /G2A /G33 /G2F /G30 /G34 /G35 /G36 /G3E /G3F书 书 书前 　　 言 　　 本标准按照 ＧＢ ／ Ｔ１．１ — ２００９ 给出的规则起草 。 本标准由中国轻工业联合会提出 。 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会 （ ＳＡＣ ／ ＴＣ２５７ ） 归口 。 本标准起草单位 ： 江苏省产品质量监督检验研究院 、 嘉文丽 （ 福建 ） 化妆品有限公司 、 无限极 （ 中国 ） 有限公司 、 苏州绿叶日用品有限公司 、 江苏奇力康皮肤药业有限公司 、 苏州世谱检测技术有限公司 、 广州质量监督检测研究院 、 上海市日用化学工业研究所 、 上海相宜本草化妆品股份有限公司 、 欧诗漫生物股份有限公司 、 广州市娇兰化妆品有限公司 、 完美 （ 广东 ） 日用品有限公司 、 江苏省食品药品监督检验研究院 、 常州市食品药品监督检验中心 、 河北省食品检验研究院 、 常州检验检测标准认证研究院 。 本标准主要起草人 ： 卢剑 、 曲梅 、 曹倩文 、 饶焕文 、 杨琼利 、 刘冬 、 吕智 、 寻知庆 、 沈敏 、 吴克 、 张征 、 张晓强 、 邹洁 、 杨洋 、 张丽华 、 顾洁 、 孙红梅 、 候爱霞 、 杨梅 、 张岩 、 林建平 、 宋淑文 、 周奇 、 李淑琴 、 杨安全 、 张彦红 、 范素芳 、 黄金凤 、 孙姗姗 、 马明 、 陈汉金 、 陈晓珍 、 郭新东 、 吴玉銮 、 彭露 、 王常捷 、 武中平 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ３９９９９ — ２０２１ 引 　　 言 　　 本标准的被测物质是我国 《 化妆品安全技术规范 （ ２０１５ 年版 ）》 规定的禁用物质 。 禁用物质是指不能作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品中的物质 。《 化妆品安全技术规范 （ ２０１５ 年版 ）》 规定 ： 若技术上无法避免禁用物质作为杂质带入化妆品时 ， 国家有限量规定的应符合其规定 ； 未规定限量的 ， 应进行安全性风险评估 ， 确保在正常 、 合理及可预见的使用条件下不得对人体健康产生危害 。 目前我国尚未规定这些物质的限量值 ， 本标准的制定 ， 仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法 。 Ⅱ 犌犅 ／ 犜 ３９９９９ — ２０２１ 化妆品中恩诺沙星等 １５ 种禁用喹诺酮类抗生素的测定 　 液相色谱  串联质谱法 １ 　 范围 本标准规定了化妆品中 １５ 种禁用喹诺酮类抗生素的液相色谱  串联质谱测定方法的原理 、 试剂或材料 、 仪器设备 、 试验步骤 、 结果计年 、 回收率和精密度 、 允许差等内容 。 本标准适用于水剂类 、 乳液类和非蜡基膏霜类化妆品中依诺沙星 、 麻保沙星 、 诺氟沙星 、 氧氟沙星 、 氟罗沙星 、 培氟沙星 、 环丙沙星 、 洛美沙星 、 丹诺沙星 、 恩诺沙星 、 奥比沙星 、 沙拉沙星 、 司帕沙星 、 双氟沙星和莫西沙星的测定 。 本标准不适用于粉类化妆品中喹诺酮类抗生素的测定 。 本标准 １５ 种喹诺酮类抗生素的方法检出限均为 ０．１５ｍｇ ／ ｋｇ ， 定量限均为 ０．５０ｍｇ ／ ｋｇ 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。 凡是注日期的引用文件 ， 仅注日期的版本适用于本文件 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本 （ 包括所有的修改单 ） 适用于本文件 。 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ 　 分析实验室用水规格和试验方法 ３ 　 原理 试样中的 １５ 种喹诺酮类抗生素采用酸化乙腈提取 ， 离心后合并提取液并浓缩 ， 正己烷净化 ， 用液相色谱  串联质谱仪测定 ， 外标法定量 。 ４ 　 试剂或材料 除另有说明外 ， 所用试剂均为分析纯 。 ４ ． １ 　 水 ， ＧＢ ／ Ｔ６６８２ ， 一级 。 ４ ． ２ 　 乙腈 ： 色谱纯 。 ４ ． ３ 　 甲酸 ： 色谱纯 。 ４ ． ４ 　 正己烷 ： 色谱纯 。 ４ ． ５ 　 ０．１％ 甲酸乙腈溶液 ： 准确量取 １．０ｍＬ 甲酸 （ ４．３ ） 至 １０００ｍＬ 容量瓶中 ， 用乙腈 （ ４．２ ） 稀释至刻度 。 ４ ． ６ 　 ０．１％ 甲酸溶液 ： 准确量取 １．０ｍＬ 甲酸 （ ４．３ ） 至 １０００ｍＬ 容量瓶中 ， 用水稀释至刻度 。 ４ ． ７ 　 定容液 ： 准确量取 １０ｍＬ 乙腈 （ ４．２ ） 和 ９０ｍＬ０．１％ 甲酸溶液 （ ４．６ ）， 混匀 。 ４ ． ８ 　 乙腈饱和的正己烷溶液 ： 量取 ２０ｍＬ 乙腈 （ ４．２ ）， 加入到 ５０ｍＬ 正己烷 （ ４．４ ） 中 ， 混匀 ， 静置 ， 上层清液备用 。 ４ ． ９ 　 标准物质 ： 纯度均不小于 ９８％ ， １５ 种喹诺酮类抗生素标准物质的中文名称 、 英文名称 、 ＣＡＳ 号 、 分子式 、 相对分子质量及化学结构式参见附录 Ａ 中表 Ａ．１ 。 ４ ． １０ 　 混合标准工作溶液 ： 分别准确称取适量标准物质 （ ４．９ ）（ 精确至 ０．１ｍｇ ）， 用乙腈 （ ４．２ ） 配制成质量浓度为 １０００ μ ｇ ／ ｍＬ 的单标标准贮备液 （ 于 ４℃ 避光保存 ， 可保存 ３ 个月 ）。 准确移取各单标标准贮备 １ 犌犅 ／ 犜 ３９９９９ — ２０２１ 液 ０．２５ｍＬ 于 ５０ｍＬ 容量瓶中 ， 用乙腈 （ ４．２ ） 定容 ， 制得混合标准中间工作溶液 （ 各为 ５ μ ｇ ／ ｍＬ ， 现配现用 ）。 取相应的空白样品 ， 按照 ６．１ 进行处理 ， 得到基质溶液 。 准确移取适量混合标准中间工作溶液 ， 用基质溶液逐级稀释成质量浓度为 ５．０ μ ｇ ／ Ｌ 、 １０ μ ｇ ／ Ｌ 、 ２０ μ ｇ ／ Ｌ 、 ５０ μ ｇ ／ Ｌ 、 １００ μ ｇ ／ Ｌ 、 ２００ μ ｇ ／ Ｌ 的系列混合标准工作溶液 （ 现配现用 ）。 ４ ． １１ 　 滤膜 ： 孔径为 ０．２２ μ ｍ 的聚四氟乙烯滤膜 。 ５ 　 仪器设备 ５ ． １ 　 液相色谱  三重四极杆质谱联用仪 ： 配有电喷雾离子源 。 ５ ． ２ 　 分析天平 ： 感量 ０．００１ｇ 和 ０．０００１ｇ 。 ５ ． ３ 　 涡旋振荡器 。 ５ ． ４ 　 超声波清洗仪 ： 工作频率不低于 ４０ｋＨｚ 。 ５ ． ５ 　 离心机 ： 最高转速不低于 ４０００ｒ ／ ｍｉｎ 。 ５ ． ６ 　 氮吹仪 。 ６ 　 试验步骤 ６ ． １ 　 试样处理 称取试样 １．０ｇ （ 精确至 ０．００１ｇ ）， 置于 １５ｍＬ 具塞塑料离心管中 ， 加入 ８ｍＬ０．１％ 甲酸乙腈溶液 （ ４．５ ）， 涡旋振荡 １ｍｉｎ ， 超声提取 ２０ｍｉｎ ， ４０００ｒ ／ ｍｉｎ 离心 ２ｍｉｎ ， 取上清液 。 残渣用 ８ｍＬ０．１％ 甲酸乙腈溶液 （ ４．５ ） 重复提取一次 ， 合并上清液 ， 用 ０．１％ 甲酸乙腈溶液 （ ４．５ ） 定容至 ２５ｍＬ 。 准确移取 １．０ｍＬ 上述提取液 ， 于 ５０℃ 水浴中氮吹至近干 ， 用定容液 （ ４．７ ） 定容至 ２．０ｍＬ ， 加入 ２ｍＬ 乙腈饱和的正己烷溶液 （ ４．８ ）， 涡旋振荡 １ｍｉｎ ， ４０００ｒ ／ ｍｉｎ 离心 ２ｍｉｎ ， 下层清液经滤膜过滤后供液相色谱  三重四极杆质谱联用仪测定 。 ６ ． ２ 　 测定 ６ ． ２ ． １ 　 液相色谱参考工作条件 液相色谱参考工作条件如下 ： ａ ） 　 色谱柱 ： Ｃ １８ 柱 ， １．９ μ ｍ ， １００ｍｍ×２．１ｍｍ （ 内径 ） 或 Ｃ １８ 柱 ， ５．０ μ ｍ ， １５０ｍｍ×４．６ｍｍ （ 内径 ）； ｂ ） 　 流动相 ： Ａ ： ０．１％ 甲酸乙腈溶液 （ ４．５ ） 和 Ｂ ： ０．１％ 甲酸溶液 （ ４．６ ）， 进行梯度洗脱 ， 梯度洗脱程序见表 １ ； ｃ ） 　 流速 ： ０．３ｍＬ ／ ｍｉｎ ； ｄ ） 　 柱温 ： ３０℃ ； ｅ ） 　 进样量 ： ５ μ Ｌ 。 ２ 犌犅 ／ 犜 ３９９９９ — ２０２１ 表 １ 　 梯度洗脱程序 时间 ／ ｍｉｎ Ａ ／ ％ Ｂ ／ ％ ０．０ ９０ １０ ８．０ ６０ ４０ ８．１ ９０ １０ １０．０ ９０ １０ ６ ． ２ ． ２ 　 质谱参考工作条件 质谱参考工作条件如下 ： ａ ） 　 离子源 ： 电喷雾