书 书 书犐犆犛 ０７ ． ０８０ 犃 ２１ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A 犌犅 ／ 犜 ３８１７０ — ２０１９ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 犃犵犪狉狅狊犲犫犪狊犲犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺犻犮犿犲犱犻狌犿 ２０１９  １０  １８ /G28 /G29 ２０１９  １０  １８ /G2A /G2B /G27 /G28 /G2B /G2C /G2D /G2E /G2F /G30 /G31 /G32 /G21 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A /G33 /G2F /G30 /G34 /G35 /G36 /G28 /G29书 书 书前 　　 言 　　 本标准按照 ＧＢ ／ Ｔ１．１ — ２００９ 给出的规则起草 。 本标准由中国标准化研究院提出并归口 。 本标准起草单位 ： 中国科学院过程工程研究所 、 中国标准化研究院 、 中科森辉微球技术 （ 苏州 ） 有限公司 。 本标准主要起草人 ： 黄永东 、 赵岚 、 朱凯 、 吴学星 、 马光辉 、 苏志国 、 巩方玲 、 马爱进 、 杨维兴 、 王少云 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ３８１７０ — ２０１９ 琼脂糖分离介质 １ 　 范围 本标准规定了琼脂糖分离介质的分类 、 技术要求 、 检测方法 、 检验规则 、 标签 、 标志 、 包装 、 运输和贮存 。 本标准适用于琼脂糖分离介质的生产与检测 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。 凡是注日期的引用文件 ， 仅注日期的版本适用于本文件 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本 （ 包括所有的修改单 ） 适用于本文件 。 ＧＢ ／ Ｔ１９１ 　 包装储运图示标志 ＧＢ ／ Ｔ５４７５ 　 离子交换树脂取样方法 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ 　 分析实验室用水规格和试验方法 ３ 　 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件 。 ３ ． １ 琼脂糖分离介质 　 犪犵犪狉狅狊犲犫犪狊犲犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺犻犮犿犲犱犻狌犿 以琼脂糖为主要原料制备的一类球形分离介质 。 ３ ． ２ 非特异性吸附量 　 犪犿狅狌狀狋狅犳狀狅狀狊狆犲犮犻犳犻犮犪犱狊狅狉狆狋犻狅狀 琼脂糖分离介质对细胞色素 Ｃ 的吸附量 。 ４ 　 分类 按琼脂糖含量分为 ４％ 琼脂糖分离介质和 ６％ 琼脂糖分离介质 。 ５ 　 技术要求 ５ ． １ 　 外观要求 琼脂糖分离介质应球形饱满 、 表面光滑 ， 在光学显微镜下应具有透明性 。 ５ ． ２ 　 性能要求 应符合表 １ 中的规定 。 １ 犌犅 ／ 犜 ３８１７０ — ２０１９ 表 １ 　 琼脂糖分离介质的主要性能要求 项目指标 ４％ 琼脂糖分离介质 ６％ 琼脂糖分离介质 粒径平均粒径 （ 珚 犱 ）／ μ ｍ ９０．０±１３．５ ３４．０±６．８ ９０．０±１３．５ ３４．０±６．８ 范围粒径比 （ 犠 粒径 ）／ ％ ≥ ９０ ａ ≥ ９０ ｂ ≥ ９０ ａ ≥ ９０ ｂ 最高流速 ｃ ／（ ｃｍ ／ ｈ ） ≥ ２１０ ≥ ６０ ≥ ２７０ ≥ ６０ 固含量 ／ ％ ７．５０±１．６０ １０．５０±２．００ 分配系数 ｄ （ 犓 ａｖ ） ０．５８ ～ ０．７０ （ 犕 ｐ ＝２０００００ ） ０．４３ ～ ０．６２ （ 犕 ｐ ＝２０００００ ） ０．６３ ～ ０．７５ （ 犕 ｐ ＝１０００００ ） ０．６８ ～ ０．８２ （ 犕 ｐ ＝５００００ ） ０．７７ ～ ０．８９ （ 犕 ｐ ＝２００００ ） ０．７２ ～ ０．８６ （ 犕 ｐ ＝１００００ ） 非特异性吸附量 ｅ ／（ μ ｇ ／ ｍＬ ） ≤ １８ ≤ １８ 菌落总数 ／（ ＣＦＵ ／ ｍＬ ） ＜ １００ ＜ １００ ５ 羟甲基糠醛脱落量 ／ （ μ ｇ ／ ｍＬ ） ｐＨ３．０ ≤ ０．２５ ≤ ０．２５ ｐＨ１３．０ ≤ ０．１５ ≤ ０．１５ 　　 注 ： 犕 ｐ 为探针分子相对分子质量 。 　　 ａ 粒径在 ４５．０ μ ｍ ～ １６５．０ μ ｍ 范围内试样颗粒的体积与全部试样颗粒体积之比 。 ｂ 粒径在 ２４．０ μ ｍ ～ ４４．０ μ ｍ 范围内试样颗粒的体积与全部试样颗粒体积之比 。 ｃ 在 ０．１ＭＰａ 压力下可达最高流速 。 ｄ 以葡聚糖为溶质 。 ｅ 每毫升介质对细胞色素 Ｃ 的吸附量 。 ６ 　 检测方法 ６ ． １ 　 外观 ６ ． １ ． １ 　 样品处理 按照 ＧＢ ／ Ｔ５４７５ 直接从产品中抽取 ５ｍＬ 样品 ， 置于 ５０ｍＬＧ３ 型号砂芯漏斗中抽干 ５ｍｉｎ 。 用符合 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ 的三级水清洗 ５ 次 ， 每次 ２ｍｉｎ ， 最后用真空泵在 ０．１ＭＰａ 压力下抽干 ５ｍｉｎ 。 将洗净的琼脂糖分离介质置于烧杯中 ， 向其中补加三级水 ， 保证琼脂糖分离介质上应有 ２ｃｍ 的三级水 。 混匀后得到琼脂糖分离介质与水的混合体系 。 ６ ． １ ． ２ 　 样品观测 用塑料吸管吸取混合体系置于载玻片上 ， 调整显微镜放大倍数 。 以视野里 ８０％ 以上面积均为琼脂糖分离介质为标准 ， 用塑料吸管增减载玻片上的琼脂糖分离介质 ， 最后用盖玻片压上 。 调节光学显微镜焦距 ， 使视野中的影像清晰 。 拍摄琼脂糖分离介质照片并保存 。 ６ ． ２ 　 粒径 ６ ． ２ ． １ 　 样品处理 方法同 ６．１．１ 。 ２ 犌犅 ／ 犜 ３８１７０ — ２０１９ ６ ． ２ ． ２ 　 样品检测 设置激光粒度仪参数如下 ： 测量颗粒类型为通用型 ， 分散剂类型为水 ， 分析模式为单峰模式 ， 添加样品进行测定 。 ６ ． ２ ． ３ 　 结果计算 ６ ． ２ ． ３ ． １ 　 范围粒径比 按式 （ １ ） 计算 ： 犠 粒径 ＝ ∑ 狀 犽 ＝ 犻 犠 犽 …………………………（ １ ） 　　 式中 ： 犠 粒径 ——— 范围粒径比 ， ％ ； 犠 犽 ——— 粒径为 犽 （ μ ｍ ） 颗粒的体积与全部试样颗粒体积之比 ， ％ ； 狀 ——— 试样颗粒粒径在 ４５．０ μ ｍ ～ １６５．０ μ ｍ 范围内 ， 狀 ＝１６５ ； 试样颗粒粒径在 ２４．０ μ ｍ ～ ４４．０ μ ｍ 范围内 ， 狀 ＝４４ ； 犻 ——— 试样颗粒粒径在 ４５．０ μ ｍ ～ １６５．０ μ ｍ 范围内 ， 犻 ＝４５ ； 试样颗粒粒径在 ２４．０ μ ｍ ～ ４４．０ μ ｍ 范围内 ， 犻 ＝２４ 。 ６ ． ２ ． ３ ． ２ 　 平均粒径 平均粒径按式 （ ２ ） 计算 ： 珚 犱 ＝ ∑ 狀 犽 ＝ １ 犱 犽 犖 …………………………（ ２ ） 　　 式中 ： 珚 犱 ——— 所统计的一定数量介质颗粒的平均粒径 ， 单位为微米 （ μ ｍ ）； 犱 犽 ——— 单个颗粒的粒径 ， 单位为微米 （ μ ｍ ）； 犖 ——— 所统计的介质颗粒的数目 。 在重复性条件下获得的三次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 １０％ 。 ６ ． ３ 　 最高流速 ６ ． ３ ． １ 　 样品处理 方法同 ６．１．１ 。 ６ ． ３ ． ２ 　 样品装柱 选用  １．６０ｃｍ×２０．００ｃｍ 的层析柱 ， 堵住柱子出口 ， 将介质与水的混合浆液倒入层析柱中 ， 静置 ， 控制介质床层高度为 １０．００ｃｍ±０．２０ｃｍ ， 柱子上端充满水 。 打开柱子入口 ， 以 ０．５ｍＬ ／ ｍｉｎ 的流速连续向柱中通入 １０ 个柱体积的三级水 ， 床层稳定后即可进行测试 。 ６ ． ３ ． ３ 　 样品测定 将层析柱连入中低压层析系统 。 测定时 ， 从零开始设定一定流速 狏 狓 （ ｍＬ ／ ｍｉｎ ）， 保持该流速 ５ｍｉｎ 后 ， 记录此时柱压 狆 狓 （ ＭＰａ ）。 继续增加流速 ， 并测定相应流速下的柱压 。 直到压力达到 ０．１０ＭＰａ 为止 ， 此时对应流速记录为 狏 ０．１ 。 ３ 犌犅 ／ 犜 ３８１７０ — ２０１９ ６ ． ３ ． ４ 　 结果计算 最高流速按式 （ ３ ） 计算 ： 犉 ｍａｘ ＝ ６０ 狏 ０ ． １ 犛 …………………………（ ３ ） 　　 式中 ： 犉 ｍａｘ ——— 最高流速 ， 单位为厘米每小时 （ ｃｍ ／ ｈ ）； 狏 ０．１ ——— 在 ０．１０ＭＰａ 压力下的体积流速 ， 单位为毫升每分 （ ｍＬ ／ ｍｉｎ ）； 犛 ——— 层析柱截面积 ， 单位为平方厘米 （ ｃｍ ２ ）； ６０ ——— 分钟转化为小时的换算系数 。 在重复性条件下获得的三次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 １０％ 。 ６ ． ４ 　 固含量 ６ ． ４ ． １ 　 样品处理 方法同 ６．１．１ 。 ６ ． ４ ． ２ 　 样品称量 将 ５ｍＬ 琼脂糖分离介质与水的混合体系装入带 １０ μ ｍ 孔径筛板的离心柱内 ， 置于离心机 ， 在 ２０００ｒ ／ ｍｉｎ 下离心 ５ｍｉｎ 。 取出离心管 ， 将样品小心倒入称量瓶内 ， 盖严 。 在已恒重的两个称量瓶中分别称入 １．０ｇ 上述分离介质精确至 ０．１ｍｇ 。 ６ ． ４ ． ３ 　 样品烘干称量 将称量瓶开盖置于烘箱中 ， 于 １０５．０℃ 干燥至恒重 。 将称量瓶盖严 ， 取出置于干燥器内 ， 冷却 ３０ｍｉｎ 至室温 ， 称量 。 ６ ． ４ ． ４ 　 结果计算 固含量按式 （ ４ ） 计算 ： 犠 ＝ 犿 ２ － 犿 ０ 犿 １ － 犿 ０ × １００ …………………