书 书 书犐犆犛 ７１ ． １００ ． ７０ 犢 ４２ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A 犌犅 ／ 犜 ３５８３７ — ２０１８ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G28 /G29 /G2A /G2B /G2C /G2D /G2E /G2F /G30 /G31 /G32 /G33 /G34 /G35 /G36 犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狆狉狅犺犻犫犻狋犲犱犿犻狀狅狓犻犱犻犾犻狀犮狅狊犿犲狋犻犮狊 — 犎犻犵犺狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔 ２０１８  ０２  ０６ /G37 /G38 ２０１８  ０９  ０１ /G39 /G3A /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G2B /G2C /G2D /G2E /G2F /G30 /G2F /G31 /G32 /G33 /G21 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A /G34 /G35 /G36 /G37 /G38 /G39 /G37 /G38书 书 书前 　　 言 　　 本标准按照 ＧＢ ／ Ｔ１．１ — ２００９ 给出的规则起草 。 本标准由中国轻工业联合会提出 。 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会 （ ＳＡＣ ／ ＴＣ２５７ ） 归口 。 本标准起草单位 ： 中国检验检疫科学研究院 、 上海市日用化学工业研究所 。 本标准主要起草人 ： 郭项雨 、 马强 、 白桦 、 李文雅 、 宗艺晶 、 王婉 、 胡明珠 、 沈敏 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ３５８３７ — ２０１８ 引 　　 言 　　 本标准的被测物质是我国 《 化妆品安全技术规范 》 规定的禁用物质 。 禁用物质是指不能作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品中的物质 。《 化妆品安全技术规范 》 规定 ： 若技术上无法避免禁用物质作为杂质带入化妆品时 ， 应进行安全性风险评估 ， 确保在正常 、 合理及可预见的使用条件下不得对人体健康产生危害 。 目前我国尚未规定这些物质的限量值 ， 本标准的制定 ， 仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法 。 Ⅱ 犌犅 ／ 犜 ３５８３７ — ２０１８ 化妆品中禁用物质米诺地尔的测定高效液相色谱法 １ 　 范围 本标准规定了化妆品中禁用物质米诺地尔的高效液相色谱测定方法 。 本标准适用于具有育发生发功效的乳液 、 膏霜 、 水剂和洗发类化妆品中米诺地尔的测定 。 本标准对米诺地尔的检出限为 ５ｍｇ ／ ｋｇ ， 定量限为 １０ｍｇ ／ ｋｇ 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。 凡是注日期的引用文件 ， 仅注日期的版本适用于本文件 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本 （ 包括所有的修改单 ） 适用于本文件 。 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ 　 分析实验室用水规格和试验方法 ３ 　 原理 试样经溶剂超声提取 ， 离心过滤后 ， 以高效液相色谱进行测定 ， 外标法定量 ， 液相色谱  质谱确认 。 ４ 　 试剂和材料 除非另有说明 ， 所用试剂均为分析纯 ， 水为 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ 规定的一级水 。 ４ ． １ 　 甲醇 ： 色谱纯 。 ４ ． ２ 　 三氟乙酸 ： 色谱纯 。 ４ ． ３ 　 氯化钠 。 ４ ． ４ 　 米诺地尔标准品 ： 分子式 Ｃ ９ Ｈ １５ Ｎ ５ Ｏ ， ＣＡＳ 号 ３８３０４９１５ ， 纯度不小于 ９９％ ， 结构式参见附录 Ａ 中的图 Ａ．１ 。 ４ ． ５ 　 ７０％ 甲醇水溶液 ： 量取 ７０ｍＬ 甲醇 （ ４．１ ） 和 ３０ｍＬ 水 ， 混合后备用 。 ４ ． ６ 　 米诺地尔标准储备溶液 ： 称取米诺地尔标准品 （ ４．４ ） １０ｍｇ （ 精确至 ０．０００１ｇ ）， 置于 １００ｍＬ 容量瓶中 ， 用 ７０％ 甲醇水溶液 （ ４．５ ） 溶解并定容 ， 摇匀 ， 配制成浓度为 １００ｍｇ ／ Ｌ 的标准储备溶液 ， 于 ４℃ 保存 ， 可使用三个月 。 ５ 　 仪器和设备 ５ ． １ 　 高效液相色谱 （ ＨＰＬＣ ） 仪 ： 配有紫外检测器或二极管阵列检测器 。 ５ ． ２ 　 液相色谱  质谱 ／ 质谱 （ ＬＣＭＳ ／ ＭＳ ） 仪 ： 配有电喷雾离子源 （ ＥＳＩ ）。 ５ ． ３ 　 分析天平 ： 感量为 ０．０００１ｇ 和 ０．００１ｇ 。 ５ ． ４ 　 离心机 ： 转速不低于 ５０００ｒ ／ ｍｉｎ 。 ５ ． ５ 　 超声波清洗器 。 ５ ． ６ 　 具塞塑料离心管 ： １０ｍＬ 。 １ 犌犅 ／ 犜 ３５８３７ — ２０１８ ５ ． ７ 　 微孔滤膜 ： ０．４５ μ ｍ ， 材质为聚四氟乙烯 。 ６ 　 分析步骤 ６ ． １ 　 样品处理 ６ ． １ ． １ 　 乳液及膏霜类样品 称取 ０．５ｇ 试样 （ 精确至 ０．００１ｇ ） 置于 １０ｍＬ 具塞塑料离心管 （ ５．６ ） 中 ， 加入 １ｇ 氯化钠 （ ４．３ ）， 加入 ７０％ 甲醇水溶液 （ ４．５ ） １０ｍＬ ， 摇匀 ， 超声提取 ２０ｍｉｎ ， ５０００ｒ ／ ｍｉｎ 离心 １５ｍｉｎ 后 ， 上清液经 ０．４５ μ ｍ 微孔滤膜过滤 ， 供高效液相色谱测定 。 ６ ． １ ． ２ 　 水剂及洗发类样品 称取 ０．５ｇ 试样 （ 精确至 ０．００１ｇ ） 置于 １０ｍＬ 具塞塑料离心管 （ ５．６ ） 中 ， 加入 ７０％ 甲醇水溶液 （ ４．５ ） １０ｍＬ ， 摇匀 ， 超声提取 ２０ｍｉｎ ， ５０００ｒ ／ ｍｉｎ 离心 １５ｍｉｎ 后 ， 上清液经 ０．４５ μ ｍ 微孔滤膜过滤 ， 供高效液相色谱测定 。 ６ ． ２ 　 测定条件 高效液相色谱参考条件如下 ： ａ ） 　 色谱柱 ： Ｃ １８ ， ５ μ ｍ ， ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ （ 内径 ）， 或相当者 ； ｂ ） 流速 ： １．０ｍＬ ／ ｍｉｎ ； ｃ ） 流动相 ： 甲醇 ＋０．３％ 三氟乙酸水溶液 ＝４５＋５５ （ 体积比 ）； ｄ ） 检测波长 ： ２３０ｎｍ ； ｅ ） 柱温 ： ３０℃ ； ｆ ） 进样量 ： １０ μ Ｌ 。 ６ ． ３ 　 标准曲线的绘制 用 ７０％ 甲醇水溶液 （ ４．５ ） 将米诺地尔标准储备溶液 （ ４．６ ） 逐级稀释得到浓度为 ０．５ｍｇ ／ Ｌ 、 １ｍｇ ／ Ｌ 、 ２ｍｇ ／ Ｌ 、 ５ｍｇ ／ Ｌ 、 １０ｍｇ ／ Ｌ 、 ２０ｍｇ ／ Ｌ 标准工作溶液 ， 按 ６．２ 测定条件浓度依次由低向高进样测定 ， 以峰面积  浓度作图 ， 绘制标准工作曲线 。 米诺地尔标准品的高效液相色谱图参见附录 Ａ 中的图 Ａ．２ ， 米诺地尔标准品的紫外吸收光谱图参见附录 Ａ 中的图 Ａ．３ 。 ６ ． ４ 　 测定 按 ６．２ 测定条件对待测样品进行测定 ， 如果检出的米诺地尔的色谱峰的保留时间与标准品一致 ， 并且在扣除背景后的样品色谱图中 ， 该物质的紫外吸收光谱图与标准品一致 ， 则可初步认定样品中存在米诺地尔 ， 用外标法定量 。 米诺地尔含量应在标准曲线之内 ， 超出线性范围则应稀释后再进行分析 。 必要时 ， 阳性样品需用液相色谱  质谱进行确认试验 ， 确认试验参见附录 Ｂ 。 ６ ． ５ 　 空白试验 除不称取样品外 ， 均按上述测定条件和步骤进行 。 ７ 　 结果计算 结果按式 （ １ ） 计算 ， 计算结果保留两位小数 ， 计算结果应扣除空白值 ： ２ 犌犅 ／ 犜 ３５８３７ — ２０１８ 犠 ＝ 犮 × 犞犿 …………………………（ １ ） 　　 式中 ： 犠 ——— 样品中米诺地尔的含量 ， 单位为毫克每千克 （ ｍｇ ／ ｋｇ ）； 犮 ——— 从标准工作曲线上查出的试样溶液中米诺地尔的浓度 ， 单位为毫克每升 （ ｍｇ ／ Ｌ ）； 犞 ——— 样液最终定容体积 ， 单位为毫升 （ ｍＬ ）； 犿 ——— 试样的质量 ， 单位为克 （ ｇ ）。 ８ 　 检出限和定量限 米诺地尔的检出限为 ５ｍｇ ／ ｋｇ ， 定量限为 １０ｍｇ ／ ｋｇ 。 ９ 　 回收率和精密度 在添加浓度 １０ｍｇ ／ ｋｇ ～ ２００ｍｇ ／ ｋｇ 浓度范围内 ， 测得回收率 ８５．４％ ～ １０６．４％ ， 相对标准偏差为 ０．５％ ～ ７．６％ 。 １０ 　 允许差 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的 １０％ 。 ３ 犌犅 ／ 犜 ３５８３７ — ２０１８ 附 　 录 　 犃 （ 资料性附录 ） 米诺地尔标准品的结构式 、 高效液相色谱图和紫外吸收光谱图 　　 米诺地尔标准品的结构式见图 Ａ．１ ； 米诺地尔标准品的高效液相色谱图见图 Ａ．２ ； 米诺地尔标准品的紫外吸收光谱图见图 Ａ．３ 。 图 犃 ． １ 　 米诺地尔标准品的结构式 图 犃 ． ２ 　 米诺地尔标准品的高效液相色谱图 ４ 犌犅 ／ 犜 ３５８３７ — ２０１８ 图 犃 ． ３ 　 米诺地尔标准品的紫外吸收光谱图 ５ 犌犅 ／ 犜 ３５８３７ — ２０１８