书 书 书犐犆犛 ７９ ． ０１０ 犅 ６０ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A 犌犅 ／ 犜 ３５８１１ — ２０１８ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G28 /G29 /G2A /G2B 　 /G2C /G2D /G2E /G2F 犕犲狋犺狅犱犳狅狉犪狀犪犾狔狊犻狊狅犳犳狅狉犲狊狋狉狔犫犻狅犿犪狊狊 — 犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狊狋犪狉犮犺犮狅狀狋犲狀狋 ２０１８  ０２  ０６ /G30 /G31 ２０１８  ０９  ０１ /G32 /G33 /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G2B /G2C /G2D /G2E /G2F /G30 /G2F /G31 /G32 /G33 /G21 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A /G34 /G35 /G36 /G37 /G38 /G39 /G30 /G31书 书 书前 　　 言 　　 本标准按照 ＧＢ ／ Ｔ１．１ — ２００９ 给出的规则起草 。 本标准由国家林业局提出 。 本标准由全国林业生物质材料标准化技术委员会 （ ＳＡＣ ／ ＴＣ４１６ ） 归口 。 本标准起草单位 ： 华中农业大学 、 国际竹藤中心 、 湖北爱茵木塑制品有限责任公司 、 湖北三木木塑科技有限公司 、 厦门格灵生物技术有限公司 。 本标准主要起草人 ： 熊汉国 、 余雁 、 费本华 、 周曼 、 宋建军 、 桂斯斌 、 谭军 、 费鹏 、 陈磊 、 陈晓玲 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ３５８１１ — ２０１８ 林业生物质原料分析方法 　 淀粉测定 １ 　 范围 本标准规定了林业生物质原料中淀粉测定的术语和定义 、 原理 、 试剂 、 溶液配制 、 仪器设备 、 操作步骤 、 结果处理和表述 、 重复性 。 本标准适用于包括林产品 （ 如木材 、 竹材 、 藤材等 ）、 林业剩余物 （ 如枝丫 、 锯末 、 木屑 、 梢头 、 板皮和截头 、 果壳和果核等采伐剩余物和加工剩余物 ） 等在内的林业生物质原料中淀粉的测定 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。 凡是注日期的引用文件 ， 仅注日期的版本适用于本文件 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本 （ 包括所有的修改单 ） 适用于本文件 。 ＧＢ ／ Ｔ５００９．３ — ２０１０ 　 食品安全国家标准 　 食品中水分的测定 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ — ２００８ 　 分析实验室用水规格和试验方法 ＧＢ ／ Ｔ３０３６６ — ２０１３ 　 生物质术语 ３ 　 术语和定义 ＧＢ ／ Ｔ３０３６６ — ２０１３ 界定的以及下列术语和定义适用于本文件 。 为了便于使用 ， 以下重复列出了 ＧＢ ／ Ｔ３０３６６ — ２０１３ 中的某些术语和定义 。 ３ ． １ 林业生物质 　 犳狅狉犲狊狋狉狔犫犻狅犿犪狊狊 林业生产和加工过程中产生的生物质 。 主要包括林产品 （ 如木材 、 竹材 、 藤材等 ）、 林业剩余物 （ 如枝丫 、 锯末 、 木屑 、 梢头 、 板皮和截头 、 果壳和果核等采伐剩余物和加工剩余物 、 造纸废弃物以及废弃木材 ）、 能源林等 。 ［ ＧＢ ／ Ｔ３０３６６ — ２０１３ ， 定义 ２．１．３ ］ ４ 　 原理 将林业生物质中的干基淀粉在 α  淀粉酶作用下水解成小分子糖 ， 经盐酸水解成具有还原性质的单糖 ， 通过还原糖的含量可以换算出淀粉含量 ， 因此可对淀粉进行定量分析 。 ５ 　 试剂 ５ ． １ 　 除特殊规定试剂外 ， 所有试剂为分析纯 。 ５ ． ２ 　 碘 （ Ｉ ２ ）。 ５ ． ３ 　 碘化钾 （ ＫＩ ）。 ５ ． ４ 　 α  淀粉酶 ： 活力单位 ３０００ ～ ５０００ 。 ５ ． ５ 　 无水乙醇 （ Ｃ ２ Ｈ ５ ＯＨ ）。 １ 犌犅 ／ 犜 ３５８１１ — ２０１８ ５ ． ６ 　 甲苯 （ Ｃ ７ Ｈ ９ ）。 ５ ． ７ 　 三氯甲烷 （ ＣＨＣｌ ３ ）。 ５ ． ８ 　 盐酸 （ ＨＣｌ ）。 ５ ． ９ 　 氢氧化钠 （ ＮａＯＨ ）。 ５ ． １０ 　 二甲基亚砜 （ ＤＭＳＯ ）。 ５ ． １１ 　 水 ： 应符合 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ — ２００８ 中三级水的要求 。 ６ 　 溶液配制 ６ ． １ 　 淀粉酶溶液 ： 称取 α  淀粉酶 （ 活力单位 ３０００ ～ ５０００ ） ０．５ｇ ， 加 １００ｍＬ 水溶解 ， 加入两到三滴甲苯或三氯甲烷 ， 防止长霉 。 ６ ． ２ 　 碘溶液 ： 称取 ３．６ｇ 碘化钾溶于 ２０ｍＬ 水中 ， 加入 １．３ｇ 碘 ， 溶解后加水稀释至 １００ｍＬ 。 ６ ． ３ 　 酚酞 ： 称取 １ｇ 酚酞 ， 溶解于 ６０ｍＬ 浓度为 ９５％ 的乙醇中 ， 加蒸馏水至 １００ｍＬ 。 ６ ． ４ 　 １ｍｇ ／ ｍＬ 葡萄糖标准溶液 ： 准确称取 ０．１ｇ 在 １００℃ 干燥至恒重的无水葡萄糖 ， 加入少量水溶解后移入 １００ｍＬ 容量瓶中 ， 加入 ０．５ｍＬ 盐酸 （ 防止微生物生长 ）， 用水稀释至 １００ｍＬ 。 ６ ． ５ 　 ９５％ 乙醇 ： 取 ９５ｍＬ 无水乙醇 ， 加水定容至 １００ｍＬ 混匀 。 ６ ． ６ 　 ６ｍｏｌ ／ Ｌ 盐酸 ： 取 １２ｍｏｌ ／ Ｌ 盐酸 １００ｍＬ 加水稀释至 ２００ｍＬ 。 ６ ． ７ 　 ３ ， ５ 二硝基水杨酸溶液 ： 称取 ６．５ｇ３ ， ５ 二硝基水杨酸溶于少量水中 ， 移入 １０００ｍＬ 容量瓶中 ， 加入 ２ｍｏｌ ／ Ｌ 氢氧化钠溶液 ３２５ｍＬ ， 再加入 ４５ｇ 丙醇 ， 摇匀 ， 冷却后定容 。 ６ ． ８ 　 ２ｍｏｌ ／ Ｌ 氢氧化钠溶液 ： 称取 ８．００ｇ 氢氧化钠 ， 加水溶解并定容至 １００ｍＬ 。 ７ 　 仪器设备 ７ ． １ 　 植物粉碎机 。 ７ ． ２ 　 磁力搅拌机 。 ７ ． ３ 　 真空泵 。 ７ ． ４ 　 旋转蒸发器 ： 自带有标准磨口接口的梨形或圆底烧瓶 。 ７ ． ５ 　 天平 ： 感量分别为 ０．０１ｇ 和 ０．０００１ｇ 。 ７ ． ６ 　 锥形瓶 ： 容量为 ２５０ｍＬ ； 玻璃棒 。 ７ ． ７ 　 容量瓶 ： 容量分别为 ５０ｍＬ 、 １００ｍＬ 、 ２５０ｍＬ 和 １０００ｍＬ 。 ７ ． ８ 　 抽滤装置 ： 由玻璃砂芯漏斗 、 吸滤瓶和滤纸组成 ， 用水泵或真空泵抽滤 。 ７ ． ９ 　 恒温水浴锅 ： 能加热至 １００℃ 。 ７ ． １０ 　 回流冷凝装置 ： 能与 ２５０ｍＬ 圆底烧瓶瓶口相匹配的 。 ７ ． １１ 　 带塞比色管 ： 带有五毫升刻度的 １０ｍＬ 。 ７ ． １２ 　 圆底烧瓶 ： 容量为 ２５０ｍＬ 。 ７ ． １３ 　 紫外  可见光分光光度计 。 ８ 　 操作步骤 ８ ． １ 　 制作标准曲线 ８ ． １ ． １ 　 定容 ： 在 ８ 支 １０ｍＬ 的具塞试管中 ， 分别加入 １ｍｇ ／ ｍＬ 葡萄糖标准溶液 （ ６．４ ） ０ｍＬ 、 １ｍＬ 、 １．５ｍＬ 、 ２ｍＬ 、 ２．５ｍＬ 、 ３ｍＬ 、 ３．５ｍＬ 、 ４ｍＬ ， 按照相应比例用水 （ ５．１１ ） 进行定容稀释 ， 得到一组浓度分别为 ０ｍｇ ／ ｍＬ 、 ０．１ｍｇ ／ ｍＬ 、 ０．１５ｍｇ ／ ｍＬ 、 ０．２ｍｇ ／ ｍＬ 、 ０．２５ｍｇ ／ ｍＬ 、 ０．３ｍｇ ／ ｍＬ 、 ０．３５ｍｇ ／ ｍＬ 、 ２ 犌犅 ／ 犜 ３５８１１ — ２０１８ ０．４ｍｇ ／ ｍＬ 的葡萄糖系列标准液 。 然后 ， 取 ０ｍｇ ／ ｍＬ 、 ０．１ｍｇ ／ ｍＬ 、 ０．１５ｍｇ ／ ｍＬ 、 ０．２ｍｇ ／ ｍＬ 、 ０．２５ｍｇ ／ ｍＬ 、 ０．３ｍｇ ／ ｍＬ 、 ０．３５ｍｇ ／ ｍＬ 、 ０．４ｍｇ ／ ｍＬ 的葡萄糖标准溶液各 １ｍＬ ， 分别置于干燥的 １０ｍＬ 比色管 （ ７．１１ ） 中 ， 各加入 ３ ， ５ 二硝基水杨酸溶液 ２ｍＬ ， 置沸水浴中 ５ｍｉｎ ， 然后以流水迅速冷却 ， 加蒸馏水定容至 ５ｍＬ ， 摇匀 。 以 ０ｍｏｌ 管作参比 ， 在 ５２０ｎｍ 出测定其吸光度值 ， 并记录 。 ８ ． １ ． ２ 　 绘制标准曲线 。 ８ ． ２ 　 样品处理 ８ ． ２ ． １ 　 取待测样品 ， 用植物粉碎机 （ ７．１ ） 粉碎至全部通过 ４０ 目孔筛 ， 充分混合 ， 保存备用 。 ８ ． ２ ． ２ 　 样品水分含量的测定按 ＧＢ ／ Ｔ５００９．３ — ２０１０ 执行 。 ８ ． ２ ． ３ 　 称取试样 （ ８．２．１ ） ２ｇ ～ ５ｇ （ 犿 ０ ， 精确至 ０．０１ｇ ） 加入到装有 ２５ｍＬ 乙醇 （ ５．５ ） 的试管中 ， 放置 ２４ｈ ， 置于抽滤机上抽滤除去可溶性糖类 ， 将残留物移入 ２５０ｍＬ 锥形瓶 （ ７．６ ） 内 ， 并用 ５０ｍＬ 水清洗滤纸及漏斗 ， 洗液并入烧瓶内 。 ８ ． ２ ． ４ 　 向烧瓶内加入 ２ｍＬ 二甲基亚砜 （ ５．１０ ）， 用磁力搅拌机 （ ７．２ ） 摇匀后在沸水浴加热 １５ｍｉｎ ， 使淀粉糊化 。 ８ ． ２ ． ５ 　 将糊化的试样放置冷却至 ６０℃ 以下后 ， 加入 ２０ｍＬ α  淀粉酶溶液 （ ６．１ ）， 在恒温水浴锅 （ ７．９ ） 中 （ ５５±１ ） ℃ 保温水解 ４０ｍｉｎ ， 并用玻璃棒搅拌 。 ８ ． ２