书 书 书犐犆犛 ７１ ． １００ ． ７０ 犢 ４２ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A 犌犅 ／ 犜 ３５８０３ — ２０１８ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G28 /G29 /G2A /G2B /G2C /G2D /G2E /G2F /G30 /G31 /G32 /G33 /G34 /G35 /G36 /G37 /G38 /G39 犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狆狉狅犺犻犫犻狋犲犱狌狉狅犮犪狀犻犮犪犮犻犱犪狀犱犻狋狊犲狋犺狔犾犲狊狋犲狉犻狀犮狅狊犿犲狋犻犮狊 — 犎犻犵犺狆犲狉犳狅狉犿犪狀犮犲犾犻狇狌犻犱犮犺狉狅犿犪狋狅犵狉犪狆犺狔 ２０１８  ０２  ０６ /G3A /G3B ２０１８  ０９  ０１ /G3C /G3D /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G2B /G2C /G2D /G2E /G2F /G30 /G2F /G31 /G32 /G33 /G21 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A /G34 /G35 /G36 /G37 /G38 /G39 /G3A /G3B书 书 书前 　　 言 　　 本标准按照 ＧＢ ／ Ｔ１．１ — ２００９ 给出的规则起草 。 本标准由中国轻工业联合会提出 。 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会 （ ＳＡＣ ／ ＴＣ２５７ ） 归口 。 本标准起草单位 ： 中国检验检疫科学研究院 、 上海市日用化学工业研究所 。 本标准主要起草人 ： 马强 、 郭项雨 、 王超 、 杨海峰 、 操卫 、 李海玉 、 王志娟 、 沈敏 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ３５８０３ — ２０１８ 引 　　 言 　　 本标准的被测物质是我国 《 化妆品安全技术规范 》 规定的禁用物质 。 禁用物质是指不能作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品中的物质 。《 化妆品安全技术规范 》 规定 ： 若技术上无法避免禁用物质作为杂质带入化妆品时 ， 应进行安全性风险评估 ， 确保在正常 、 合理及可预见的使用条件下不得对人体健康产生危害 。 目前我国尚未规定这些物质的限量值 ， 本标准的制定 ， 仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法 。 Ⅱ 犌犅 ／ 犜 ３５８０３ — ２０１８ 化妆品中禁用物质尿刊酸及其乙酯的测定高效液相色谱法 １ 　 范围 本标准规定了化妆品中禁用物质尿刊酸及其乙酯的高效液相色谱测定方法 。 本标准适用于膏霜类 、 水剂类 、 唇膏类 、 散粉类 、 香波类化妆品中尿刊酸及其乙酯的测定 。 本标准对尿刊酸及其乙酯检出限为 ２ｍｇ ／ ｋｇ ， 定量限为 ５ｍｇ ／ ｋｇ 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。 凡是注日期的引用文件 ， 仅注日期的版本适用于本文 件 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本 （ 包括所有的修改单 ） 适用于本文件 。 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ 　 分析实验室用水规格和试验方法 ３ 　 原理 试样经溶剂超声提取后离心 ， 上清液经氮吹定容过滤后 ， 以高效液相色谱进行测定 ， 外标法定量 ， 液 相色谱  质谱确认 。 ４ 　 试剂和材料 除非另有说明 ， 所用试剂均为分析纯 ， 水为 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ 规定的一级水 。 ４ ． １ 　 甲醇 ： 色谱纯 。 ４ ． ２ 　 四氢呋喃 。 ４ ． ３ 　 氯化钠 。 ４ ． ４ 　 四丁基溴化铵 。 ４ ． ５ 　 尿刊酸标准品 ： 分子式 Ｃ ６ Ｈ ６ Ｎ ２ Ｏ ２ ， ＣＡＳ 号 １０４９８３ ， 纯度不小于 ９８％ ， 中文名称 、 英文名称 、 相对 分子质量 、 结构式参见附录 Ａ 中表 Ａ．１ 。 ４ ． ６ 　 尿刊酸乙酯标准品 ： 分子式 Ｃ ８ Ｈ １０ Ｎ ２ Ｏ ２ ， ＣＡＳ 号 ２７５３８３５８ ， 纯度不小于 ９７％ ， 中文名称 、 英文名 称 、 相对分子质量 、 结构式参见附录 Ａ 中表 Ａ．１ 。 ４ ． ７ 　 １０％ 甲醇水溶液 ： 量取 １０ｍＬ 甲醇 （ ４．１ ） 和 ９０ｍＬ 水 ， 混匀后备用 。 ４ ． ８ 　 ０．００５ｍｏｌ ／ Ｌ 四丁基溴化铵溶液 ： 准确称取四丁基溴化铵 （ ４．４ ） ０．８０５ｇ （ 精确至 ０．０００１ｇ ）， 置于 ５００ｍＬ 容量瓶中 ， 用水溶解并定容至刻度 。 ４ ． ９ 　 尿刊酸及其乙酯标准储备液 ： 分别称取尿刊酸标准品 （ ４．５ ） 及尿刊酸乙酯标准品 （ ４．６ ） 各 １０ｍｇ （ 精确至 ０．０００１ｇ ）， 分别置于 １０ｍＬ 容量瓶中 ， 用 １０％ 甲醇水溶液 （ ４．７ ） 溶解并定容至刻度 ， 摇匀 ， 配制成浓度为 １０００ｍｇ ／ Ｌ 的标准储备液 ， 于 ４℃ 保存 ， 可使用三个月 。 ４ ． １０ 　 尿刊酸及其乙酯混合标准储备液 ： 分别准确移取尿刊酸及其乙酯标准储备液 （ ４．９ ） 各 １ｍＬ 于 １０ｍＬ 容量瓶中 ， 用 １０％ 甲醇水溶液 （ ４．７ ） 稀释至刻度 ， 该溶液中尿刊酸及其乙酯的浓度均为 １００ｍｇ ／ Ｌ 。 １ 犌犅 ／ 犜 ３５８０３ — ２０１８ ５ 　 仪器和设备 ５ ． １ 　 高效液相色谱 （ ＨＰＬＣ ） 仪 ： 配有紫外检测器或二极管阵列检测器 。 ５ ． ２ 　 液相色谱  质谱 ／ 质谱 （ ＬＣＭＳ ／ ＭＳ ） 仪 ： 配有电喷雾离子源 （ ＥＳＩ ）。 ５ ． ３ 　 分析天平 ： 感量为 ０．０００１ｇ 和 ０．００１ｇ 。 ５ ． ４ 　 离心机 ： 转速不低于 ８０００ｒ ／ ｍｉｎ 。 ５ ． ５ 　 超声波清洗器 。 ５ ． ６ 　 氮吹仪 。 ５ ． ７ 　 具塞塑料离心管 ： １０ｍＬ 。 ５ ． ８ 　 带刻度氮吹管 ： １０ｍＬ 。 ５ ． ９ 　 微孔滤膜 ： ０．４５ μ ｍ ， 材质为聚四氟乙烯 。 ６ 　 分析步骤 ６ ． １ 　 样品处理 ６ ． １ ． １ 　 膏霜类 、 水剂类 、 散粉类及香波类样品 称取 ０．２ｇ （ 精确至 ０．００１ｇ ） 试样置于 １０ｍＬ 具塞塑料离心管 （ ５．７ ） 中 ， 加入 １０ｍＬ 甲醇 （ ４．１ ）， 摇匀 ， 超声提取 ２０ｍｉｎ ， ８０００ｒ ／ ｍｉｎ 离心 １５ｍｉｎ ， 将上清液转移至带刻度氮吹管 （ ５．８ ） 中 ， 缓慢氮吹至 １ｍＬ ， 加入 ９ｍＬ 水 ， 混匀 ， 经 ０．４５ μ ｍ 微孔滤膜过滤 ， 供高效液相色谱测定 。 ６ ． １ ． ２ 　 唇膏类样品 称取 ０．２ｇ （ 精确至 ０．００１ｇ ） 试样置于 １０ｍＬ 具塞塑料离心管 （ ５．７ ） 中 ， 加入 ０．５ｍＬ 四氢呋喃 （ ４．２ ）， 再加入 ９．５ｍＬ 甲醇 （ ４．１ ）， 摇匀 ， 超声提取 ２０ｍｉｎ ， ８０００ｒ ／ ｍｉｎ 离心 １５ｍｉｎ ， 将上清液转移至带刻度氮吹管 （ ５．８ ） 中 ， 缓慢氮吹至 １ｍＬ ， 加入 ９ｍＬ 水 ， 混匀 ， 经 ０．４５ μ ｍ 微孔滤膜过滤 ， 供高效液相色谱测定 。 ６ ． ２ 　 测定条件 高效液相色谱参考条件如下 ： ａ ） 　 色谱柱 ： ＸＴｅｒｒａＭＳＣ １８ ， ５ μ ｍ ， ２５０ｍｍ×４．６ｍｍ （ 内径 ）， 或相当者 ； ｂ ） 流速 ： １．０ｍＬ ／ ｍｉｎ ； ｃ ） 流动相 ： 甲醇 ＋０．００５ｍｏｌ ／ Ｌ 四丁基溴化铵溶液 ＝３０＋７０ （ 体积比 ）； ｄ ） 检测波长 ： ２８５ｎｍ ； ｅ ） 柱温 ： ３５℃ ； ｆ ） 进样量 ： １０ μ Ｌ 。 ６ ． ３ 　 标准曲线的绘制 用 １０％ 甲醇水溶液 （ ４．７ ） 将尿刊酸及其乙酯混合标准储备液 （ ４．１０ ） 逐级稀释得到浓度为 ０．２ｍｇ ／ Ｌ 、 ０．５ｍｇ ／ Ｌ 、 １ｍｇ ／ Ｌ 、 ２ｍｇ ／ Ｌ 、 ５ｍｇ ／ Ｌ 、 １０ｍｇ ／ Ｌ 的混合标准工作溶液 。 按 ６．２ 的测定条件浓度依次由低向高进样测定 ， 以峰面积  浓度作图 ， 绘制标准工作曲线 。 尿刊酸及其乙酯标准品的色谱图参见附录 Ｂ 中图 Ｂ．１ ， 尿刊酸及其乙酯标准品的紫外吸收光谱图参见附录 Ｂ 中图 Ｂ．２ 。 ２ 犌犅 ／ 犜 ３５８０３ — ２０１８ ６ ． ４ 　 测定 按 ６．２ 测定条件对待测样品进行测定 ， 如果检出的尿刊酸及其乙酯的色谱峰的保留时间与标准品一致 ， 并且在扣除背景后的样品色谱图中 ， 该物质的紫外吸收光谱图与标准品一致 ， 则可初步认定样品中存在尿刊酸及其乙酯 ， 用外标法定量 。 尿刊酸及其乙酯含量应在标准曲线之内 ， 超出线性范围则应稀释后再进行分析 。 必要时 ， 阳性样品需用液相色谱  质谱进行确认试验 （ 参见附录 Ｃ ）。 ６ ． ５ 　 空白试验 除不称取样品外 ， 均按上述测定条件和步骤进行 。 ７ 　 结果计算 结果按式 （ １ ） 计算 ， 计算结果保留两位小数 ， 计算结果应扣除空白值 ： 犠 ＝ 犮 × 犞犿 …………………………（ １ ） 　　 式中 ： 犠 ——— 样品中尿刊酸及其乙酯的含量 ， 单位为毫克每千克 （ ｍｇ ／ ｋｇ ）； 犮 ——— 从标准工作曲线上查出的试液中尿刊酸及其乙酯的浓度 ， 单位为毫克每升 （ ｍｇ ／ Ｌ ）； 犞 ——— 样液最终定容体积 ， 单位为毫升 （ ｍＬ ）； 犿 ——— 试样的质量