书 书 书犐犆犛 ７１ ． ０４０ ． ３０ 犌 ６０ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A 犌犅 ／ 犜 ３５５０７ — ２０１７ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G28 /G29 犌犲狀犲狉犪犾狉狌犾犲犳狅狉犫犻狅犮犺犲犿犻犮犪犾狉犲犪犵犲狀狋狊 ２０１７  １２  ２９ /G2A /G2B ２０１８  ０７  ０１ /G2C /G2D /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G2B /G2C /G2D /G2E /G2F /G30 /G2F /G31 /G32 /G33 /G21 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A /G34 /G35 /G36 /G37 /G38 /G39 /G2A /G2B书 书 书前 　　 言 　　 本标准按照 ＧＢ ／ Ｔ１．１ — ２００９ 给出的规则起草 。 本标准由中国石油和化学工业联合会提出 。 本标准由全国化学标准化技术委员会化学试剂分会 （ ＳＡＣ ／ ＴＣ６３ ／ ＳＣ３ ） 归口 。 本标准起草单位 ： 中国计量科学研究院 、 中国科学院过程工程研究所 、 北京化学试剂研究所 、 广西分析测试研究中心 、 江苏省计量科学研究院 、 广州康昕瑞基因健康科技有限公司 、 中国测试技术研究院 。 本标准主要起草人 ： 全灿 、 罗坚 、 李红梅 、 刘守廷 、 韩宝英 、 孟蓉 、 王玉华 、 欧阳广娜 、 盛司潼 、 周李华 、 石莲花 、 郝媛 、 杨菡 、 宋德伟 、 黄挺 、 隋志伟 、 金有训 、 肖鹏 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ３５５０７ — ２０１７ 生化用试剂测定通则 １ 　 范围 本标准规定了生化用试剂的通用事项及通用方法 。 本标准适用于生化缓冲剂 、 糖类 、 脂类 、 核酸 、 氨基酸 、 酶 、 蛋白质等生化用试剂的检验 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。 凡是注日期的引用文件 ， 仅注日期的版本适用于本文件 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本 （ 包括所有的修改单 ） 适用于本文件 。 ＧＢ ／ Ｔ９７２１ 　 化学试剂 　 分子吸收分光光度法通则 （ 紫外和可见光部分 ） ＧＢ ／ Ｔ９７２４ 　 化学试剂 　 ｐＨ 值测定通则 ＧＢ ／ Ｔ１１４４６．９ 　 电子级水中微粒的仪器测试方法 ＧＢ１９４８９ 　 实验室 　 生物安全通用要求 ＧＢ ／ Ｔ２３９７７ 　 染料 　 含盐量的测定 　 电导率法 ＧＢ ／ Ｔ３０３０１ 　 高纯试剂试验方法通则 ＧＢ ／ Ｔ３３０８７ 　 仪器分析用高纯水规格及试验方法 ＱＪ２２１４ 　 洁净室 （ 区 ） 内洁净度级别及评定 ＹＹ０５６９ 　 Ⅱ 级生物安全柜中华人民共和国药典 （ ２０１５ 版 ） ３ 　 术语和定义 ＧＢ ／ Ｔ９７２１ 、 ＧＢ ／ Ｔ３０３０１ 、 ＧＢ ／ Ｔ３３０８７ 界定的以及下列术语和定义适用于本文件 。 ３ ． １ 生化用试剂 　 犫犻狅犮犺犲犿犻犮犪犾狉犲犪犵犲狀狋狊 生物领域中的生物化学或化学检测 、 合成用的化学试剂 ， 如应用于基因操作 、 细胞融合 、 组织细胞培养等过程 。 ３ ． ２ 灭菌 　 狊狋犲狉犻犾犻狕犪狋犻狅狀 杀灭对象中存在的微生物 。 常用的灭菌方法有加热法 、 过滤法 、 辐照法 、 气体法以及医用液体法等 。 ３ ． ３ 除菌 　 狉犲犿狅狏犪犾狅犳犫犪犮狋犲狉犻犪 通过过滤或者清洗方法除去对象中的微生物 。 ３ ． ４ 指标菌 　 犻狀犱犲狓犫犪犮狋犲狉犻犪 用来选择灭菌条件或者确认灭菌效果的细菌 。 ３ ． ５ 无菌条件 　 犪狊犲狆狋犻犮犮狅狀犱犻狋犻狅狀 环境与对象中不存在任何微生物生长的条件 。 灭菌操作可形成无菌条件 ， 且该条件应通过无菌方 １ 犌犅 ／ 犜 ３５５０７ — ２０１７ 法等进行测试 。 ３ ． ６ 超滤 　 狌犾狋狉犪犳犻犾狋狉犪狋犻狅狀 采用反渗透膜 、 超滤膜或两者组合等膜过滤装置进行的滤过除去目标对象中包括病毒 、 支原体 、 细菌 、 真菌和毒素等微生物 。 ３ ． ７ 酶单位 　 犲狀狕狔犿犲狌狀犻狋 在特定的时间 、 条件下 ， 将单位数量的底物转化为产物所需要的酶量 。 ３ ． ８ 酶活力 　 犲狀狕狔犿犲犪犮狋犻狏犻狋狔 酶的催化活性程度 ， 即酶的反应速率 。 酶活力用酶单位表示 。 ３ ． ９ 比活力 　 狊狆犲犮犻犳犻犮犪犮狋犻狏犻狋狔 单位量的酶表现出来的活力 。 ３ ． １０ 酶失活 　 犱犲犪犮狋犻狏犪狋犻狅狀狅犳犲狀狕狔犿犲 使酶的活性降低或消失 ， 或酶自身活性的降低或消失 。 酶失活包括热失活 、 酸失活等 ， 也可由添加酶抑制剂以及去除辅助因子等因素造成 。 ４ 　 通用事项 ４ ． １ 　 试验环境 ４ ． １ ． １ 　 总则 除特殊说明外 ， 生物安全部分按照 ＧＢ１９４８９ 的规定执行 。 ４ ． １ ． ２ 　 实验室 按 ＱＪ２２１４ 规定 ， 测定实验室中悬浮粒子数 。 生物洁净室中的 ０．５ μ ｍ 粒径以上的粒子数宜在 ３．５×１０ ３ 个 ／ ｍ ３ 以下 。 ４ ． １ ． ３ 　 洁净工作台 按照 ＧＢ ／ Ｔ３０３０１ 的标准执行 。 可根据需要配备空气幕 。 ４ ． １ ． ４ 　 生物安全柜 按 ＹＹ０５６９ 的规定执行 。 ４ ． １ ． ５ 　 防辐射设施 设计防辐射设施是为了预防在进行放射性同位素操作及发生污染时 ， 可能造成的辐射损伤 。 ４ ． ２ 　 实验用水 实验用水符合 ＧＢ ／ Ｔ３３０８７ 规定 。 ４ ． ３ 　 试剂 除另有说明 ， 本标准仅使用最高级别的试剂 。 应确认空白测定值不影响样品的测定 。 需要避光的 ２ 犌犅 ／ 犜 ３５５０７ — ２０１７ 试剂应存放于含有锰 、 铁等元素的有色玻璃器皿内 。 特殊情况下 ， 可使用石英玻璃或硼硅酸盐低碱玻璃 （ 热阻玻璃 ）。 ４ ． ４ 　 标准物质 标准物质和标准溶液应附有不确定度证书 。 ４ ． ５ 　 器具 ４ ． ５ ． １ 　 玻璃器具 应使用一级硬玻璃或经过钝化处理的玻璃器具 。 对于玻璃中的某些组分 ， 如钠 、 钾 、 硼 、 硅 、 铝等 ， 应留意其可能发生的溶解现象 。 带有磨口部分的器具 ， 磨口部分易附着污染物 ， 应使用带有透明磨口的玻璃器具 。 ４ ． ５ ． ２ 　 石英器具 应使用透明石英玻璃制作的石英器具 。 带有磨口部分的器具 ， 磨口部分易附着污染物 ， 应使用带有透明磨口的石英器具 。 ４ ． ５ ． ３ 　 合成树脂器具 应使用聚四氟乙烯树脂 、 聚乙烯树脂 、 聚丙烯树脂 、 丙烯酸树脂等制作的合成树脂器具 。 不添加染料 、 填充物以及阻燃剂 。 ４ ． ５ ． ４ 　 铂器具 应使用纯度 ９９．９％ 以上铂制成的铂器具 。 ４ ． ６ 　 器具的清洗和保存 ４ ． ６ ． １ 　 玻璃器具和石英器具 先用自来水充分清洗 ， 再用 ５０℃ ～ ６０℃ 的硝酸溶液 （ １＋１ ） 浸泡 ， 最后以实验用水冲洗 。 ４ ． ６ ． ２ 　 合成树脂器具 将被清洗器具置入盛有硝酸溶液 （ １＋３ ） 的聚丙烯树脂容器中浸泡 ２ｈ 以上 ， 再超声清洗 １ｈ 以上 ， 最后以实验用水充分冲洗 。 ４ ． ６ ． ３ 　 铂器具 将被清洗器具置入 ８０℃ 以上的硝酸溶液 （ １＋３ ） 中浸泡超过 １ｈ ， 然后用实验用水充分洗净 。 如以前试验造成器具交叉污染 ， 可先用熔化的焦硫酸钾或硫酸氢钾溶液去除污染物后 ， 再进行清洗 。 ４ ． ６ ． ４ 　 器具的保存 器具清洗后应进行干燥 ， 塞紧瓶塞 ， 存放于无污染的环境中 。 ４ ． ７ 　 灭菌 在灭菌操作前 ， 应先确认工作环境 。 根据操作条件和目标物属性 ， 参照表 １ 选择一种或多种灭菌方法进行灭菌 。 应对水 、 试剂 、 容器 、 器械以及工作服等灭菌 ， 对内毒素进行灭活和去除 。 在检查工作环境的适应性 ３ 犌犅 ／ 犜 ３５５０７ — ２０１７ 时 ， 可利用指标菌 。 根据灭菌方法按表 ２ 选择合适的常用指标菌 。 表 １ 　 灭菌方法 方法 适用对象 操作条件 加 热 法火焰法 玻璃 、 陶瓷或金属等材质器具 火焰加热数秒 干燥加热法玻璃 、 陶瓷 、 金属 、 纤维等材质器具 ， 矿物油 、 脂肪 、 脂肪 油 、 固体试剂及耐干燥加热的物质等 １３５℃ ～ １４５℃ ， ３ｈ ～ ５ｈ ； １６０℃ ～ １７０℃ ， ２ｈ ～ ４ｈ ； １８０℃ ～ ２００℃ ， ０．５ｈ ～ １ｈ 高压蒸汽法玻璃 、 陶瓷 、 金属 、 橡胶 、 纸 、 纤维等材质器具 ， 水 、 培养 基 、 固体和液体试剂及耐高压蒸汽的物质等 １１５℃ ， ３０ｍｉｎ ； １２１℃ ， ２０ｍｉｎ ； １２６℃ ， １５ｍｉｎ 流动水蒸汽法玻璃 、 陶瓷 、 金属 、 橡胶 、 纸 、 纤维等材质器具 ， 水以及在 干燥加热或高压水蒸汽条件下有可能被破坏的培养基 、 固体和液体试剂等流动蒸汽 １００℃ ， ３０ｍｉｎ ～ ６０ｍｉｎ 沸腾法玻璃 、 陶瓷 、 金属 、 橡胶 、 纸 、 纤维等材质器具 ， 在干燥加 热或高压水蒸汽条件下有可能被破坏的培养基 、 固体和 液体试剂等沸腾水中浸泡 １５ｍｉｎ 以上 间歇法橡胶材质器具 ， 在干燥加热或高压水蒸汽条件下有可能 被破坏的培养基