书 书 书犐犆犛 ６５ ． ０２０ ． ０１ 犅 １６ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A 犌犅 ／ 犜 ３５３３５ — ２０１７ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G28 /G29 /G28 /G2A /G2B /G2C /G2D 犌狌犻犱犲犾犻狀犲狊犳狅狉狊狌狉狏犲犻犾犾犪狀犮犲狅犳 犆狌犮狌犿犫犲狉犵狉犲犲狀犿狅狋狋犾犲犿狅狊犪犻犮狏犻狉狌狊 ２０１７  １２  ２９ /G2E /G2F ２０１９  ０１  ０１ /G30 /G31 /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G2B /G2C /G2D /G2E /G2F /G30 /G2F /G31 /G32 /G33 /G21 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A /G34 /G35 /G36 /G37 /G38 /G39 /G2E /G2F书 书 书前 　　 言 　　 本标准按照 ＧＢ ／ Ｔ１．１ — ２００９ 给出的规则起草 。 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会 （ ＳＡＣ ／ ＴＣ２７１ ） 提出并归口 。 本标准主要起草单位 ： 全国农业技术推广服务中心 、 辽宁省植物保护站 、 上海市农业技术推广服务中心 。 本标准主要起草人 ： 李潇楠 、 蔡明 、 熊红利 、 罗金燕 、 江冬 、 赵玉强 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ３５３３５ — ２０１７ 黄瓜绿斑驳花叶病毒病监测规范 １ 　 范围 本标准规定了由黄瓜绿斑驳花叶病毒引起的黄瓜绿斑驳花叶病毒病的调查监测程序和方法 。 本标准适用于黄瓜绿斑驳花叶病毒病的疫情监测 。 ２ 　 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。 凡是注日期的引用文件 ， 仅注日期的版本适用于本文件 。 凡是不注日期的引用文件 ， 其最新版本 （ 包括所有的修改单 ） 适用于本文件 。 ＮＹ ／ Ｔ２２８８ — ２０１２ 　 黄瓜绿斑驳花叶病毒检疫检测与鉴定方法 ３ 　 监测依据 黄瓜绿斑驳花叶病毒 （ 犆狌犮狌犿犫犲狉犵狉犲犲狀犿狅狋狋犾犲犿狅狊犪犻犮狏犻狉狌狊 ， ＣＧＭＭＶ ）， 属烟草花叶病毒属 （ 犜狅犫犪犿狅狏犻狉狌狊 ）， 随嫁接穗 、 砧木 、 种子传播 。 该病毒可引起西瓜果肉暗红色出现空洞 ， 并且呈丝状纤维化 ， 最终腐烂变味 。 其发生规律 、 传播途径和典型症状等是该病监测的重要依据 。 ４ 　 监测工具 剪刀 、 取样袋 、 手套 、 小镊子 、 荧光记录笔 、 标签纸 、 记录表 、 消毒液等 。 ５ 　 监测 ５ ． １ 　 监测准备 收集当地西瓜 、 甜瓜 、 黄瓜 、 瓠瓜 、 葫芦 、 南瓜等葫芦科植物的种植情况 ， 黄瓜绿斑驳花叶病毒病发生情况等相关资料 ； 制定简便易行的黄瓜绿斑驳花叶病毒病监测计划 。 ５ ． ２ 　 监测作物 监测作物包括西瓜 、 甜瓜 、 黄瓜 、 瓠瓜 、 葫芦 、 南瓜等葫芦科植物 。 ５ ． ３ 　 监测区域 ５ ． ３ ． １ 　 苗圃 重点监测葫芦科种苗繁育基地 、 砧木育苗基地等高风险地区 。 ５ ． ３ ． ２ 　 未发生区 重点监测从疫情发生区调入葫芦科种苗及产品的地区 ， 境外葫芦科引种种植区等疫情发生高风险区域 。 １ 犌犅 ／ 犜 ３５３３５ — ２０１７ ５ ． ３ ． ３ 　 发生区 重点监测发生疫情的代表性地块和边缘区 。 主要监测多年种植寄主植物并有黄瓜绿斑驳花叶病毒病发生历史的地块 。 ５ ． ４ 　 监测时期 在葫芦科作物苗期 、 伸蔓期 、 坐果期 、 果实成熟期等黄瓜绿斑驳花叶病毒病显症期分别进行调查 ， 调查时间一般为 ３ 月上中旬至 １０ 月中下旬 ， 各地可根据当地的气候和葫芦科的生育期确定具体的调查时间 ， 重点开展苗期监测 。 ５ ． ５ 　 监测方法 ５ ． ５ ． １ 　 苗圃 苗期对苗圃进行踏查 ， 调查面积应占苗圃种植面积的 ２０％ ～ ３０％ 。 踏查发现疑似疫情的要逐圃 、 逐株调查至少 １ 次 。 ５ ． ５ ． ２ 　 未发生区 ５ ． ５ ． ２ ． １ 　 访问调查 向瓜农 、 农资经销商 、 农技人员等相关人员询问有关葫芦科作物果肉腐烂和花叶情况 ， 初步了解疫情可能发生地点 、 时间 、 危害情况 。 对询问过程中发现的黄瓜绿斑驳花叶病毒病可疑发生地区 ， 进行深入重点调查 。 ５ ． ５ ． ２ ． ２ 　 踏查 对访问调查过程中发现的可疑发生区和其他高风险葫芦科作物种植区 ， 在生长期进行 ２ 次 ～ ３ 次踏查 ， 观察田间有无黄瓜绿斑驳花叶病毒病发病症状 （ 参见附录 Ａ ）。 调查面积应占可疑发生区和其他高风险葫芦科作物种植区种植面积的 ２０％ ～ ３０％ 以上 。 ５ ． ５ ． ２ ． ３ 　 定点调查 在访问调查和踏查过程中 ， 发现可疑疫情应进行室内鉴定 。 ５ ． ５ ． ３ 　 发生区 ５ ． ５ ． ３ ． １ 　 发生区范围监测 采取访问调查和踏查方法 （ 具体方法见 ５．５．２．１ 和 ５．５．２．２ ）， 监测发生区的范围变化 。 ５ ． ５ ． ３ ． ２ 　 发生区发生动态监测 采取定点调查法 ， 每县 （ 市 、 区 ） 选 １０ 个调查点 ， 每点随机调查 １０ 株 ， 统计发病株率与病果率 ， 每 ７ｄ 调查 １ 次 ， 整个生育期调查 ４ 次 。 ６ 　 疫情鉴定 ６ ． １ 　 采样 采集具有典型症状样本 ， 利用快速免疫检测试纸条对疑似症状样本进行快速鉴定 ， 检测阳性样品 ， ２ 犌犅 ／ 犜 ３５３３５ — ２０１７ 带回实验室进行室内检测 ， 必要时将疑似发病植株根际周围深 ０ｃｍ ～ １０ｃｍ 的土壤 １００ｇ 带回室内检测 。 标签记录好采集时间 、 地点 、 采集人 、 发病症状及发病面积等必要信息 。 带回室内的样品 ， 如不能及时进行检验 ， 植株样品要用草纸压干 ； 土壤样品可经室温自然风干 ， 然后装入可密封的塑料袋 ， 室温条件下保存待检 。 ６ ． ２ 　 鉴定 按照 ＮＹ ／ Ｔ２２８８ — ２０１２ 的要求进行 。 ７ 　 监测报告 详细记录监测结果 ， 记载调查地点 、 时间 、 寄主植物名称 、 发生面积 、 危害程度等 ， 填入附录 Ｂ 中表 Ｂ．１ 。 并将原始记录表连同照片 、 影像等其他资料整理汇总形成监测报告 ， 并按要求逐级报送上级植物检疫机构 。 ８ 　 标本保存与处理 监测过程中使用的有关材料和用具 ， 在使用完毕后应进行消毒和除害处理 。 经检疫鉴定后的种子样品应保存在 ４℃ 冰箱内 ， 叶片和果实样品应保存在 －２０℃ 以下或冻干保存 ３ 个月备查 ， 保存期满后 ， 进行灭活处理 。 ３ 犌犅 ／ 犜 ３５３３５ — ２０１７ 附 　 录 　 犃 （ 资料性附录 ） 黄瓜绿斑驳花叶病毒病典型症状 犃 ． １ 　 西瓜染病症状 叶片出现不规则的褪绿色 ， 呈斑驳花叶状 ， 绿色部分隆起 ， 叶缘向上翻卷 ， 叶片略变窄细 。 果梗有时出现褐色坏死条纹 。 果肉内出现条丝状黄色纤维 ， 种子周围的果肉变暗红色水渍状 ， 严重时果肉全变成暗红色 ， 内有大量空洞 ， 软化 ， 腐烂变味 ， 不能食用 。 如图 Ａ．１ 和图 Ａ．２ 所示 。 图 犃 ． １ 　 西瓜叶片发病典型症状 图 犃 ． ２ 　 西瓜果实发病典型症状 犃 ． ２ 　 甜瓜染病症状 感病后茎梢新叶出现黄斑 ， 但随新叶老化症状减轻 。 成株侧枝叶出现不整形或星状黄花叶 ， 生育后期顶部叶片有时再现大型黄色轮斑 。 果实有两类症状 ： 一种在果实表面出现绿色斑 ； 另一种在绿色部的中心会出现灰白色 。 犃 ． ３ 　 黄瓜染病症状 感病初期新叶出现黄色小斑点 ， 以后黄色部分扩展成花叶 ， 并发生深绿瘤状突起 ， 叶脉呈绿带状 。 发病轻时果实只出现淡黄色圆形小斑点 ， 严重时出现深绿色瘤状突起变成畸形 。 犃 ． ４ 　 瓠瓜染病症状 叶片出现花叶 ， 有绿色突起 ， 脉间黄化 ， 叶脉呈绿带状 。 犃 ． ５ 　 葫芦染病症状 幼叶出现淡黄色花叶 ， 其后出现浓绿凹凸斑 ， 随叶片老化症状减轻 。 ４ 犌犅 ／ 犜 ３５３３５ — ２０１７ 附 　 录 　 犅 （ 规范性附录 ） 黄瓜绿斑驳花叶病毒病调查监测记录表 表 犅 ． １ 　 黄瓜绿斑驳花叶病毒病调查监测记录表 调查单位 （ 盖章 ）： 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 调查人 ： 调查地点 ： 　　　　　　 县 　　　　　　 乡 （ 镇 ） 　　　　　　　 村 调查时间 ： 作物名称 ： 生育期 ： 栽培方式 ： 种植面积 （ 亩 １ ） ）： 调查面积 （ 亩 ）： 种苗来源 ： 疑似症状 ／ 危害状 ： 田 间 调 查调查地块 １ ２ ３ ４ ５ ６ ７ ８ ９ １０ 调查面积 ／ 亩 发生面积 ／ 亩 调查株数 发病株数 病株率 ／ ％ 病果率 ／ ％ 备注 ： １ ） 　 亩为非法定计量单位 ， １ 亩 ≈ ６６７ｍ ２ 。 ５ 犌犅 ／ 犜 ３５３３５ — ２０１７