中华人民共和国国家标准 GB5009.27—2016 食品安全国家标准 食品中苯并(a)芘的测定 2016-12-23发布 2017-06-23实施 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 国家食品药品监督管理总局发布GB5009.27—2016 Ⅰ 前 言 本标准代替GB/T5009.27—2003《食品中苯并(a)芘的测定》、GB/T22509—2008《动植物油脂 苯并(a)芘的测定 反相高效液相色谱法》、SC/T3041—2008《水产品中苯并(a)芘的测定 高效液相 色谱法》和NY/T1666—2008《肉制品中苯并(a)芘的测定 高效液相色谱法》。 本标准与GB/T5009.27—2003、GB/T22509—2008、SC/T3041—2008和NY/T1666—2008相 比,主要变化如下: ———标准名称修改为“食品安全国家标准 食品中苯并(a)芘的测定”; ———修改了方法的适用范围; ———修改了样品前处理方法; ———删除了荧光分光光度法与目测比色法。GB5009.27—2016 1 食品安全国家标准 食品中苯并(a)芘的测定 1 范围 本标准规定了食品中苯并(a)芘的测定方法。 本标准适用于谷物及其制品(稻谷、糙米、大米、小麦、小麦粉、玉米、玉米面、玉米渣、玉米片)、肉及 肉制品(熏、烧、烤肉类)、水产动物及其制品(熏、烤水产品)、油脂及其制品中苯并(a)芘的测定。 2 原理 试样经过有机溶剂提取,中性氧化铝或分子印迹小柱净化,浓缩至干,乙腈溶解,反相液相色谱分 离,荧光检测器检测,根据色谱峰的保留时间定性,外标法定量。 3 试剂和材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。 3.1 试剂 3.1.1 甲苯(C7H8):色谱纯。 3.1.2 乙腈(CH3CN):色谱纯。 3.1.3 正己烷(C6H14):色谱纯。 3.1.4 二氯甲烷(CH2Cl2):色谱纯。 3.2 标准品 苯并(a)芘标准品(C20H12,CAS号:50-32-8):纯度≥99.0%,或经国家认证并授予标准物质证书的 标准物质。 警告———苯并(a)芘是一种已知的致癌物质,测定时应特别注意安全防护!测定应在通风柜中进行 并戴手套,尽量减少暴露。如已污染了皮肤,应采用10%次氯酸钠水溶液浸泡和洗刷,在紫外光下观察 皮肤上有无蓝紫色斑点,一直洗到蓝色斑点消失为止。 3.3 标准溶液配制 3.3.1 苯并(a)芘标准储备液(100μg/mL):准确称取苯并(a)芘1mg(精确到0.01mg)于10mL容量 瓶中,用甲苯溶解,定容。避光保存在0℃~5℃的冰箱中,保存期1年。 3.3.2 苯并(a)芘标准中间液(1.0μg/mL):吸取0.10mL苯并(a)芘标准储备液(100μg/mL),用乙腈定容 到10mL。避光保存在0℃~5℃的冰箱中,保存期1个月。 3.3.3 苯并(a)芘标准工作液:把苯并(a)芘标准中间液(1.0μg/mL)用乙腈稀释得到0.5ng/mL、1.0ng/ mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL的校准曲线溶液,临用现配。GB5009.27—2016 2 3.4 材料 3.4.1 中性氧化铝柱:填料粒径75μm~150μm,22g,60mL。 注:空气中水分对其性能影响很大,打开柱子包装后应立即使用或密闭避光保存。由于不同品牌氧化铝活性存在 差异,建议对质控样品进行测试,或做加标回收试验,以验证氧化铝活性是否满足回收率要求。 3.4.2 苯并(a)芘分子印迹柱:500mg,6mL。 注:由于不同品牌分子印迹柱质量存在差异,建议对质控样品进行测试,或做加标回收试验,以验证是否满足要求。 3.4.3 微孔滤膜:0.45μm。 4 仪器和设备 4.1 液相色谱仪:配有荧光检测器。 4.2 分析天平:感量为0.01mg和1mg。 4.3 粉碎机。 4.4 组织匀浆机。 4.5 离心机:转速≥4000r/min。 4.6 涡旋振荡器。 4.7 超声波振荡器。 4.8 旋转蒸发器或氮气吹干装置。 4.9 固相萃取装置。 5 分析步骤 5.1 试样制备、提取及净化 5.1.1 谷物及其制品 预处理:去除杂质,磨碎成均匀的样品,储于洁净的样品瓶中,并标明标记,于室温下或按产品包装 要求的保存条件保存备用。 提取:称取1g(精确到0.001g)试样,加入5mL正己烷,旋涡混合0.5min,40℃下超声提取 10min,4000r/min离心5min,转移出上清液。再加入5mL正己烷重复提取一次。合并上清液,用 下列2种净化方法之一进行净化。 净化方法1:采用中性氧化铝柱,用30mL正己烷活化柱子,待液面降至柱床时,关闭底部旋塞。将 待净化液转移进柱子,打开旋塞,以1mL/min的速度收集净化液到茄形瓶,再转入50mL正己烷洗 脱,继续收集净化液。将净化液在40℃下旋转蒸至约1mL,转移至色谱仪进样小瓶,在40℃氮气流下 浓缩至近干。用1mL正己烷清洗茄形瓶,将洗涤液再次转移至色谱仪进样小瓶并浓缩至干。准确吸 取1mL乙腈到色谱仪进样小瓶,涡旋复溶0.5min,过微孔滤膜后供液相色谱测定。 净化方法2:采用苯并(a)芘分子印迹柱,依次用5mL二氯甲烷及5mL正己烷活化柱子。将待净 化液转移进柱子,待液面降至柱床时,用6mL正己烷淋洗柱子,弃去流出液。用6mL二氯甲烷洗脱并 收集净化液到试管中。将净化液在40℃下氮气吹干,准确吸取1mL乙腈涡旋复溶0.5min,过微孔滤 膜后供液相色谱测定。 5.1.2 熏、烧、烤肉类及熏、烤水产品 预处理:肉去骨、鱼去刺、贝去壳,把可食部分绞碎均匀,储于洁净的样品瓶中,并标明标记,于