书 书 书/G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A 犌犅 １５１９３ ． １５ — ２０１５ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G28 /G29 /G2A /G2B /G2C /G2D /G2E ２０１５  ０８  ０７ /G2F /G30 ２０１５  １０  ０７ /G31 /G32 /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G2B /G2C /G26 /G2D /G2E /G2C /G2F /G30 /G31 /G32 /G2F /G30 书 书 书犌犅 １５１９３ ． １５ — ２０１５ Ⅰ 　　　　前 　　 言 　　 本标准代替 ＧＢ１５１９３．１５ — ２００３ 《 繁殖试验 》。 本标准与 ＧＢ１５１９３．１５ — ２００３ 相比 ， 主要变化如下 ： ——— 标准名称修改为 “ 食品安全国家标准 　 生殖毒性试验 ”； ——— 增加了 “ 生殖毒性 ”、“ 发育毒性 ” 和 “ 母体毒性 ” 的术语和定义 ； ——— 修改了 “ 试验方法 ”， 将 “ 实验动物 ”“ 剂量与分组 ”“ 操作步骤 ” 内容并入 “ 试验方法 ”； ——— 修改了 “ 试验报告 ” 内容 ； ——— 增加了 “ 试验的解释 ” 内容 。 犌犅 １５１９３ ． １５ — ２０１５ １ 　　　　食品安全国家标准 生殖毒性试验 １ 　 范围 本标准规定了生殖毒性试验的试验方法和技术要求 。 本标准适用于评价受试物的生殖毒性作用 。 ２ 　 术语和定义 ２ ． １ 　 生殖毒性 对雄性和雌性生殖功能或能力的损害和对后代的有害影响 。 生殖毒性既可发生于妊娠期 ， 也可发 生于妊前期和哺乳期 。 表现为外源化学物对生殖过程的影响 ， 例如生殖器官及内分泌系统的变化 ， 对性 周期和性行为的影响 ， 以及对生育力和妊娠结局的影响等 。 ２ ． ２ 　 发育毒性 个体在出生前暴露于受试物 、 发育成为成体之前 （ 包括胚期 、 胎期以及出生后 ） 出现的有害作用 ， 表 现为发育生物体的结构异常 、 生长改变 、 功能缺陷和死亡 。 ２ ． ３ 　 母体毒性 受试物引起亲代雌性妊娠动物直接或间接的健康损害效应 ， 表现为增重减少 、 功能异常 、 中毒体征 ， 甚至死亡 。 ３ 　 试验目的和原理 凡受试物能引起生殖机能障碍 ， 干扰配子的形成或使生殖细胞受损 ， 其结果除可影响受精卵及其着 床而导致不孕外 ， 尚可影响胚胎的发生及发育 ， 如胚胎死亡导致自然流产 、 胎仔发育迟缓以及胎仔畸形 。 如果对母体造成不良影响会出现妊娠 、 分娩和乳汁分泌的异常 ， 也可出现胎仔出生后发育异常 。 ４ 　 试验方法 ４ ． １ 　 受试物 受试物应使用原始样品 ， 若不能使用原始样品 ， 应按照受试物处理原则对受试物进行适当处理 。 将 受试物掺入饲料 、 饮用水或灌胃给予 。 ４ ． ２ 　 实验动物 实验动物的选择应符合国家标准和有关规定 。 首选大鼠 ， 选用 ７ 周龄 ～ ９ 周龄 ， 试验开始时动物体 重的差异应不超过平均体重的 ±２０％ 。 试验前动物在实验动物房应至少进行 ３ｄ ～ ５ｄ 环境适应和检 犌犅 １５１９３ ． １５ — ２０１５ ２ 　　　　 疫观察 。 每组应有足够的雌鼠和雄鼠配对 ， 产生约 ２０ 只受孕雌鼠 。 为此 ， 一般在试验开始时两种性别 每组各需要亲代 （ Ｆ ０ 代 ） 大鼠 ３０ 只 ； 在继续的试验中用来交配的各代大鼠 ［ 子一代 （ Ｆ １ 代 ）、 子二代 （ Ｆ ２ 代 ） 以及子三代 （ Ｆ ３ 代 ）］ 每种性别每组需要 ２５ 只 （ 至少每窝雌雄各取 １ 只 ， 最多每窝雌雄各取 ２ 只 ）。 选用的 Ｆ ０ 代雌鼠应为非经产鼠 、 非孕鼠 。 ４ ． ３ 　 剂量及分组 动物按体重随机分组 ， 试验为至少设三个受试物组和一个对照组 。 应考虑受试物特性 （ 如生物代谢 和生物蓄积特性 ） 的影响作用 。 如果受试物使用溶媒 ， 对照组应给予溶媒的最大使用量 。 如果受试物引 起动物食物摄入量和利用率的下降时 ， 那么对照组动物需要与试验组动物配对喂饲 。 某些受试物的高 剂量受试物组设计应考虑其对营养素平衡的影响 ， 对于非营养成分受试物剂量不应超过饲料的 ５％ 。 在受试物理化和生物特性允许的条件下 ， 最高剂量应使 Ｆ ０ 代动物出现明显的毒性反应 ， 但不引起 动物死亡 ； 中间剂量可引起轻微的毒性反应 ； 低剂量应不引起亲代及其子代动物的任何毒性反应 （ 可按 最大未观察到有害作用剂量的 １ ／ ３０ ， 或人体推荐摄入量的 １０ 倍 ）。 ４ ． ４ 　 实验动物处理 ４ ． ４ ． １ 　 受试物的给予 ４ ． ４ ． １ ． １ 　 试验期间 ， 所有动物应采用相同的方式给予受试物 ； 每日在同一时间段给予受试物 ， 每周 ７ｄ 。 受试物应在交配前连续给予两种性别的各代大鼠至少 １０ 周 ， 并继续给予受试物至试验结束 ， 其中子代 的雌鼠和雄鼠在断乳后每日给予 。 各代大鼠给予的受试物剂量 （ 按动物体重给予 ， ｍｇ ／ ｋｇ 体重或 ｇ ／ ｋｇ 体重 ）、 饲料和饮水相同 。 ４ ． ４ ． １ ． ２ 　 根据受试物的特性或试验目的 ， 选择合适的给予方式 。 首选掺入饲料 ， 若受试物加入饲料或饮 水中影响动物的适口性 ， 则应选择灌胃给予受试物 。 ４ ． ４ ． １ ． ３ 　 受试物灌胃给予 ， 要将受试物溶解或悬浮于合适的溶媒中 ， 首选溶媒为水 ， 不溶于水的受试物 可使用植物油 （ 如橄榄油 、 玉米油等 ）， 不溶于水或油的受试物可使用羧甲基纤维素 、 淀粉等配成混悬液 或糊状物等 。 受试物应新鲜配制 ， 有资料表明其溶液或混悬液储存稳定者除外 。 应每日在同一时间灌 胃 １ 次 ， 每周称体重 ２ 次 ， 根据体重调整灌胃体积 。 灌胃体积一般不超过 １０ｍＬ ／ ｋｇ 体重 ， 如为水溶液 时 ， 最大灌胃体积可达 ２０ｍＬ ／ ｋｇ 体重 ； 如为油性液体 ， 灌胃体积应不超过 ４ｍＬ ／ ｋｇ 体重 ； 各组灌胃体 积一致 。 ４ ． ４ ． １ ． ４ 　 受试物掺入饲料或饮水给予 ， 要将受试物与饲料 （ 或饮水 ） 充分混匀并保证该受试物配制的稳 定性和均一性 ， 以不影响动物摄食 、 营养平衡和饮水量为原则 ， 受试物掺入饲料比例一般小于质量分数 的 ５％ ， 若超过 ５％ 时 （ 最大不应超过 １０％ ）， 可调整对照组饲料营养素水平 （ 若受试物无热量或营养成 分 ， 且添加比例大于 ５％ 时 ， 对照组饲料应填充甲基纤维素等 ， 掺入量等同高剂量 ）， 使其与剂量组饲料 营养素水平保持一致 ， 同时增设未处理对照组 ； 也可视受试物热量或营养成分的状况调整剂量组饲料营 养素水平 ， 使其与对照组饲料营养素水平保持一致 。 受试物剂量单位是每千克体重所摄入受试物的毫 克 （ 或克 ） 数 ， 即 ｍｇ ／ ｋｇ 体重 （ 或 ｇ ／ ｋｇ 体重 ）， 当受试物掺入饲料其剂量单位也可表示为 ｍｇ ／ ｋｇ （ 或 ｇ ／ ｋｇ ） 饲料 ， 掺入饮水则表示为 ｍｇ ／ ｍＬ 水 。 受试物掺入饲料时 ， 需将受试物剂量 （ ｍｇ ／ ｋｇ 体重 ） 按动物 每 １００ｇ 体重的摄食量折算为受试物饲料浓度 （ ｍｇ ／ ｋｇ 饲料 ）。 ４ ． ４ ． ２ 　 交配 每次交配时 ， 每只雌鼠应与从同一受试物组随机选择的单个雄鼠同笼 （ １∶１ 交配 ）， 直到检测到阴 栓 ， 或者经过 ３ 个发情期或 ２ 周 。 查到阴栓后应将雌 、 雄鼠分开 ， 如果经过 ３ 个发情期或 ２ 周还未进行