ICS 07.100.30 C 53 GR 中华人民共和国国家标准 GB/T 4789.27—2008 代替GB/T4789.27—2003 食品卫生微生物学检验 鲜乳中抗生素残留检验 Microbiological examination of food hygiene- Examination of residue of antibiotics in fresh milk 2008-11-21发布 2009-03-01实施 中华人民共和国卫生部 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T4789.27—2008 前言 的颜色反应试验》（AOACOfficialMethod982.18：Beta-lactamantibioticsinfluidmilkproducts Qualitativecolorreactiontests)作为第二法。 本标准与AOAC982.18相比主要区别如下： 扩大适用范围为鲜乳中能抑制嗜热脂肪芽胞杆菌卡利德变种（Bacillusstearothermophilus 一 var，calidolactis)的抗生素的检验，也可用于复原乳、消毒灭菌乳、乳粉中抗生素的检测； 修改了试剂盒加营养片方法，直接将含有试验菌株芽胞的培养基制备在小试管内； 一将“注：偶尔有特殊批次的试剂盒可能需要较长的温育时间才能完全显色。如果每隔 10min检查一次颜色显示情况，并记录每个批号产品所需要的最适当的温育时间。（Note： Occasionally kits of a particular Lot No. may require a longer incubation time for color to fully develop. If ......Check color development at lo min intervals and record optimum incu- bationtimerequiredforeachLotNo.）”程序修改为如果颜色没有变化，须再于水浴中培养 30min作最终观察”； 删除青霉素酶确证程序。 本标准代替GB/T4789.27一2003《食品卫生微生物学检验鲜乳中抗生素残留量检验》。 本标准与GB/T4789.27一2003相比主要修改如下： 标准名称修改为“食品卫生微生物学检验鲜乳中抗生素残留检验”； 一增加了第二法，将原标准的嗜热乳酸链球菌方法确定为第一法； 增加了附录A“培养基和试剂”。 本标准的附录A为规范性附录。 本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。 本标准由中华人民共和国卫生部负责解释。 本标准负责起草单位：福建省疾病预防控制中心 本标准参加起草单位：中国疾病预防控制中心营养与食品安全所、中国检验检疫科学研究院、河南 省疾病预防控制中心、湖北省疾病预防控制中心。 本标准主要起草人：马群飞、郭云昌、李瑾、田卫、廖兴广、马弋、田静 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： GB4789.27—1984、GB/T4789.27—1994、GB/T4789.27—2003。 1 GB/T4789.27—2008 食品卫生微生物学检验 鲜乳中抗生素残留检验 1范围 本标准规定了鲜乳中抗生素残留的检验方法 本标准的第一法适用于鲜乳中能抑制嗜热链球菌（Streptococcusthermophilus）的抗生素的检验： 第二法适用于鲜乳中能抑制嗜热脂肪芽胞杆菌卡利德变种（Bacillusstearothermophilusvar.calidola ctis)的抗生素的检验，也可用于复原乳、消毒灭菌乳、乳粉中抗生素的检测。 第一法嗜热链球菌抑制法 2原理 样品经过80℃杀菌后，添加嗜热链球菌菌液。培养一段时间后，嗜热链球菌开始增殖。这时候加 入代谢底物2，3，5-氯化三苯四氮唑（TTC），若该样品中不含有抗生素或抗生素的浓度低于检测限，嗜 热链球菌将继续增殖，还原TTC成为红色物质。相反，如果样品中含有高于检测限的抑菌剂，则嗜热 链球菌受到抑制，因此指示剂TTC不还原，保持原色 3 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： 3.1冰箱:2℃~5℃、-20℃~-5℃。 3.2恒温培养箱：36℃±1℃。 3.3带盖恒温水浴锅：36℃±1℃、80℃±2℃。 3. 4 天平：感量0.1g.0.001g。 3.5 无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度），10.0mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头 3. 6 5无菌试管：18mm×180mm。 3.7 温度计:0℃~100℃。 3.8 旋涡混匀器。 4菌种、培养基和试剂 4. 1 菌种：嗜热链球菌。 4.2 灭菌脱脂乳：见第A1章。 4.34%2，3，5-氯化三苯四氮唑（TTC)水溶液：见第A.2章。 4.4青霉素G参照溶液：见第A.3章 249 5检验程序 鲜乳中抗生素残留检验程序见图1。 1