ICS71.100.70 Y42 中华人民共和国国家标准 GB/T29671—2013 化 妆品中苯酚磺酸锌的测定 高效液相色谱法 Determinationofzinc4-hydroxybenzenesulphonateincosmetics— Highperformanceliquidchromatography 2013-09-06发布 2014-02-15实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会发布前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会(SAC/TC257)归口。 本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院、上海市日用化学工业研究所。 本标准主要起草人:王烨、马强、白桦、王星、席广成、席海为、卢晓静、刘茜、武晓剑、康薇。 ⅠGB/T29671—2013 化妆品中苯酚磺酸锌的测定 高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了化妆品中苯酚磺酸锌的高效液相色谱测定方法。 本标准适用于水剂、香波、膏霜、蜡基、散粉类化妆品中苯酚磺酸锌的测定。 本标准对于苯酚磺酸锌的检出限和定量限:水剂类和香波类样品中检出限为24mg/kg,定量限为 30mg/kg;膏霜类和蜡基类样品中检出限为120mg/kg,定量限为140mg/kg;散粉类样品中检出限为 60mg/kg,定量限为90mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 试样经溶剂提取,离心过滤后,用高效液相色谱法进行测定,保留时间定性,外标法定量。 4 试剂和材料 除非另有规定,所用试剂均为分析纯。水为GB/T6682规定的一级水。 4.1 乙腈:色谱纯。 4.2 四氢呋喃:色谱纯。 4.3 40%四丁基氢氧化铵水溶液(体积分数)。 4.4 磷酸二氢钠。 4.5 磷酸溶液(0.5%):准确量取5mL磷酸于1L容量瓶中,用水定容至刻度,混匀后备用。 4.6 20%乙腈水溶液:准确量取20mL乙腈和80mL水,混匀后备用。 4.7 80%乙腈水溶液:准确量取80mL乙腈和20mL水,混匀后备用。 4.8 苯酚磺酸锌标准物质:分子式C12H10O8S2Zn,CAS号127-82-2,纯度不小于99%,结构式参见附 录A的图A.1。 5 仪器和设备 5.1 高效液相色谱(HPLC)仪:配有紫外检测器或二极管阵列检测器。 5.2 pH计:范围0.00~14.00,精度±0.01。 5.3 分析天平:感量为0.00001g和0.0001g。 1GB/T29671—2013 5.4 离心机:转速不低于5000r/min。 5.5 超声波水浴。 5.6 具塞锥形瓶:50mL。 5.7 具塞塑料离心管:10mL。 5.8 微孔滤膜:0.45μm,PTFE。 6 分析步骤 6.1 样品处理 6.1.1 水剂类样品 称取0.5g(精确至0.001g)试样于50mL具塞锥形瓶中,加入15mL20%乙腈水溶液(4.6),超声 提取30min。取部分溶液转移至10mL具塞塑料离心管中,以5000r/min离心10min,上清液经 0.45μm微孔滤膜过滤,供高效液相色谱测定。 6.1.2 香波类样品 称取0.5g(精确至0.001g)试样于50mL具塞锥形瓶中,加入15mL20%乙腈水溶液(4.6),超声 提取30min。取部分溶液转移至10mL具塞塑料离心管中,以5000r/min离心10min,上清液经 0.45μm微孔滤膜过滤,供高效液相色谱测定。 6.1.3 膏霜类样品 称取0.5g(精确至0.001g)试样于50mL具塞锥形瓶中,加入15mL80%乙腈水溶液(4.7),超声 提取30min。取部分溶液转移至10mL具塞塑料离心管中,以5000r/min离心10min,上清液经 0.45μm微孔滤膜过滤,供高效液相色谱测定。 6.1.4 蜡基类样品 称取0.5g(精确至0.001g)试样于50mL具塞锥形瓶中,加入1.5mL四氢呋喃(4.2),超声提取 10min,再加80%乙腈水溶液(4.7)至15mL,超声提取30min。取部分溶液转移至10mL具塞塑料离 心管中,以5000r/min离心15min,上清液经0.45μm微孔滤膜过滤,供高效液相色谱测定。 6.1.5 散粉类样品 称取0.5g(精确至0.001g)试样于50mL具塞锥形瓶中,加入15mL80%乙腈水溶液(4.7),超声 提取30min。取部分溶液转移至10mL具塞塑料离心管中,以5000r/min离心10min,上清液经 0.45μm微孔滤膜过滤,供高效液相色谱测定。 6.2 测定条件 高效液相色谱测定的参考条件如下: a) 色谱柱:KromasilC18,5μm,250mm×4.6mm(内径),或相当者; b)流动相:乙腈+0.025mol/L磷酸二氢钠溶液(含0.005mol/L四丁基氢氧化铵,用磷酸溶液 (4.5)调至pH2.5)=20+80(体积比); c)流速:1.0mL/min; d)柱温:30℃; 2GB/T29671—2013 e)检测波长:230nm; f)进样量:10μL。 6.3 标准曲线的绘制 用流动相溶液[6.2.b)]将苯酚磺酸锌标准储备溶液逐级稀释得到的浓度为0.5μg/mL、1μg/mL、 2μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL的标准工作溶液,按6.2的测定条件浓度由低到 高进样测定,以峰面积-浓度作图,得到标准曲线回归方程。 苯酚磺酸锌标准品色谱图参见图A.2。 6.4 测定 按6.2的测定条件对待测样液进行测定,记录色谱峰的保留时间和峰面积,可从标准曲线上由色谱 峰的峰面积计算相应的苯酚磺酸锌浓度。待测样液中苯酚磺酸锌的响应值应在标准曲线的线性范围 内,超过线性范围则应稀释后再进样分析。 6.5 定性确证 高效液相色谱仪对样品进行定性测定,进行样品测定时,如果检出被测苯酚磺酸锌的色谱峰的保留 时间与标准品相一致,并且在扣除背景后的样品色谱图中,该物质的紫外吸收光谱与标准品的紫外吸收 光谱相一致,则可初步确认样品中存在被测苯酚磺酸锌。必要时,需用其他方法进行确认试验。 苯酚磺酸锌标准品紫外吸收光谱图参见图A.3。 6.6 空白试验 除不称取样品外,均按上述测定条件和步骤进行。 7 结果计算 结果按式(1)计算,计算结果保留两位小数,计算结果应扣除空白值: w=c×V m………………………………(1) 式中: w———试样中被测苯酚磺酸锌的含量,单位为毫克每千克(mg/kg); c———从标准工作曲线上查出的样液中苯酚磺酸锌的浓度,单位为微克每毫升(μg/mL); V———样液最终定容体积,单位为毫升(mL); m———试样的质量,单位为克(g)。 8 检出限和定量限 苯酚磺酸锌的检出限和定量限:水剂类和香波类样品中检出限为24mg/kg,定量限为30mg/kg; 膏霜类和蜡基类样品中检出限为120mg/kg,定量限为140mg/kg;散粉类样品中检出限为60mg/kg, 定量限为90mg/kg。 9 回收率和精密度 在添加浓度24mg/kg~360mg/kg的范围内,回收率在93.6%~99.1%之间,相对标准偏差在 3GB/T29671—2013 0.6%~3.9%。 10 允许差 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的10%。 4GB/T29671—2013 附 录 A (资料性附录) 苯酚磺酸锌标准品的结构式、高效液相色谱图和紫外吸收光谱图 图A.1 苯酚磺酸锌标准品的结构式 图A.2 苯酚磺酸锌标准品的高效液相色谱图 图A.3 苯酚磺酸锌标准品的紫外吸收光谱图 5GB/T29671—2013