ICS71.100.70 Y42 中华人民共和国国家标准 GB/T29670—2013 化 妆品中萘、苯并[a]蒽等9种 多环芳烃的测定 气相色谱-质谱法 Determinationof9polycyclicaromatichydrocarbonsincludingnaphthalene, benzo[a]anthraceneincosmetics—Gaschromatography-massspectrometry 2013-09-06发布 2014-02-15实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会发布前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会(SAC/TC257)归口。 本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院、上海市日用化学工业研究所。 本标准主要起草人:肖海清、王宏伟、马强、于红梅、付艳玲、席海为、张庆、操卫、李琼、沈敏。 ⅠGB/T29670—2013 引 言 本标准中的被测物质是我国《化妆品卫生规范》规定的禁用物质,不得作为化妆品生产原料即组分 添加到化妆品中。如果技术上无法避免禁用物质作为杂质带入化妆品时,则化妆品成品应符合《化妆品 卫生规范》对化妆品的一般要求,即在正常及合理的可预见的使用条件下,不得对人体健康产生危害。 目前我国尚未规定这些物质的限量值,本标准的制定,仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法。 ⅡGB/T29670—2013 化妆品中萘、苯并[a]蒽等9种 多环芳烃的测定 气相色谱-质谱法 警告———使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验。本标准并未指出所有可能的安全问 题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施,并保证符合国家有关规定的条件。 1 范围 本标准规定了化妆品中萘、苯并[a]蒽、 、苯并[b]荧蒽、苯并[j]荧蒽、苯并[k]荧蒽、苯并[e]芘、苯 并[a]芘、二苯并[a,h]蒽等9种多环芳烃的气相色谱-质谱测定方法。 本标准适用于乳液、膏状、霜类、粉状、水类等化妆品中萘、苯并[a]蒽、 、苯并[b]荧蒽、苯并[j]荧 蒽、苯并[k]荧蒽、苯并[e]芘、苯并[a]芘、二苯并[a,h]蒽等多环芳烃的测定。 本标准的检出限和定量限:萘、苯并[a]蒽、 、苯并[b]荧蒽、苯并[j]荧蒽、苯并[k]荧蒽、苯并[e] 芘、苯并[a]芘、二苯并[a,h]蒽的检出限为0.1mg/kg,定量限为0.2mg/kg。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 多环芳烃 polycyclicaromatichydrocarbons 简称为PAHs,是以两个或两个以上的苯环通过聚合键相连接的多环碳氢化合物,指表1中9种碳 氢化合物。 表1 9种多环芳烃 序号 中文名称 英文名称 CAS号 化学结构式 1 萘 Naphthalene 91-20-3 2 苯并[a]蒽 Benzo[a]anthracene 56-55-3 3 Chrysene 218-01-9 4 苯并[b]荧蒽aBenzo[b]fluoranthene 205-99-2 5 苯并[j]荧蒽 Benzo[j]fluoranthene 205-99-2 6 苯并[k]荧蒽 Benzo[k]fluoranthene 207-08-9 7 苯并[e]芘 Benzo[e]pyrene 192-97-2 1GB/T29670—2013 表1(续) 序号 中文名称 英文名称 CAS号 化学结构式 8 苯并[a]芘 Benzo[a]pyrene 50-32-8 9 二苯并[a,h]蒽Dibenzo[a,h]anthracene 53-70-3 a苯并[b]荧蒽在我国《化妆品卫生规范》中被称为苯并[e]醋亚菲(Benz(e)acephenanthrylene)。 3 方法提要 样品中的多环芳烃用甲醇超声提取,用环己烷液-液萃取后浓缩,用硅胶-中性氧化铝柱法净化后, 采用气相色谱-质谱法测定。 4 试剂和材料 除非另有规定,仅使用分析纯的试剂和超纯水(电阻率≥18.2MΩ)。 4.1 二氯甲烷:色谱纯。 4.2 正己烷:色谱纯。 4.3 甲醇:色谱纯。 4.4 环己烷:色谱纯。 4.5 正己烷-二氯甲烷(3+2):取3体积正己烷(4.2)和2体积二氯甲烷(4.1)混合均匀。 4.6 无水硫酸钠:使用前在430℃烘6h以上。 4.7 硅胶:粒径0.075mm~0.15mm,使用前130℃活化16h。 4.8 中性氧化铝:粒径100mm~200mm,使用前160℃活化16h,加3%水(质量分数)去活化,平衡 48h以上。 4.9 脱脂棉。 4.10 多环芳烃标准物质:纯度不小于98.2%。 4.11 多环芳烃标准储备溶液(1000mg/L):分别称取9种多环芳烃标准物质(4.10)0.1000g,用二 氯甲烷(4.1)溶解后分别定容至100mL容量瓶中,密封、避光、-18℃保存,有效期1年。 4.12 多环芳烃混合标准储备液(40mg/L):分别准确移取9种多环芳烃标准储备溶液(4.11)1mL于 25mL容量瓶中,用正己烷(4.2)定容至刻度,密封、避光、-18℃保存,有效期6个月。 4.13 多环芳烃标准工作液:取一定量混和标准储备液(4.12),用正己烷(4.2)稀释,配制成浓度为 0.05mg/L、0.1mg/L、0.5mg/L、1mg/L、2mg/L的溶液。 5 仪器和设备 5.1 分液漏斗,100mL。 5.2 超声波清洗器,输出功率600W,频率40kHz。 5.3 旋转蒸发仪。 5.4 玻璃层析柱,300mm×20mm。 5.5 气相色谱-质谱联用仪。 2GB/T29670—2013 5.6 有机相过滤膜,0.45μm。 5.7 分析天平,感量0.1mg。 6 分析步骤 6.1 提取 称取化妆品试样0.5g(精确到0.0001g),置于50mL具塞三角瓶中,加入甲醇10mL,充分混匀, 在超声波清洗器中超声提取15min,将上清液转移至分液漏斗中,下层沉淀用甲醇重复提取两次,每次 2mL,合并上清液,用环己烷液液萃取4次,每次20mL,合并上层环己烷相,浓缩至约2mL。 6.2 净化 净化柱下端为脱脂棉(使用前用二氯甲烷索氏提取24h以上),依次用二氯甲烷湿法装填10g活 化过的硅胶、5g中性氧化铝,上端为3g无水硫酸钠。用40mL正己烷(4.2)淋洗硅胶柱,加入提取液 (6.1),用25mL正己烷(4.2)淋洗,弃去洗脱液,用40mL正己烷-二氯甲烷(3+2)(4.5)洗脱并收集, 洗脱液经旋转蒸发浓缩至约2mL,定量转移至1mL刻度试管中,用氮气缓慢吹至1mL,过0.45μm 有机滤膜后,供GC-MS分析。 6.3 测定 6.3.1 色谱条件 由于测试结果取决于所使用的仪器,因此不可能给出气相色谱分析的通用参数。设定的参数应保 证色谱测定时被测组分与其他组分能够得到有效的分离,下列给出的参数证明是可行的。 a) 色谱柱:HP-5MS1)(30m×0.25mm×0.25μm); b) 程序升温:起始温度50℃(保持2min),以20℃/min升至160℃,之后以4℃/min升至 235℃,保持12min,最后以5℃/min升至290℃(保持5min); c) 进样口温度:280℃; d) 色谱-质谱接口温度:280℃; e) 离子源温度:230℃; f) 四极杆温度:150℃; g) 离子源:EI; h) 电离能量:70eV; i) 质量扫描范围:50amu~350amu; j) 载气:氦气,流速1mL/min; k) 进样量:1μL; l) 进样方式:不分流进样; m) 溶剂延迟时间:6min。 6.3.2 标准工作曲线绘制 将标准工作溶液(4.13)按浓度由低至高顺序依次进样,按色谱条件(6.3.1)进行测定,以色谱峰的 峰面积为纵坐标对应的浓度为横坐标作图,绘制标准工作曲线。苯并[b]荧蒽、苯并[j]荧蒽和苯并[k] 荧蒽这三种物质系同分异构体,以这三种物质的总峰面积和总浓度的对应关系绘制标准工作曲线。多 环芳烃标准物质特征碎片离子、定量离子和选择离子色谱图参见附录A和附录B。 1) HP-5MS是由供应商提供的商品名。给出这一信息是为了方便本标准的使用者,并不表示对该产品的认可。 如果其他等效产品具有相同的效果,则可使用这些等效产品。 3GB/T29670—2013 6.3.3 试样测定 将试样溶液(6.2)注入气相色谱-质谱仪,按色谱条件(6.3.1)进行测定,记录色谱峰的保留时间和 峰面积。如果试样溶液和标准工作溶液的选择离子色谱图中在相同保留时间有色谱峰出现,根据全扫 描质谱图进行确证,根据选择离子色谱图进行定量,由选择定量离子峰的峰面积可从标准曲线上求出相 应的色谱峰浓度。苯并[b]荧蒽、苯并[j]荧蒽和苯并[k]荧蒽这三种物质以其总峰面积和总浓度的线性 关系计算其总量。样品溶液中的多环芳烃的响应值均应在标准工作曲线浓度范围之内,多环芳烃含量 高的试样可取适量试样溶液用正己烷(4.2)稀释后进行测定。按以上步骤,对同一试样进行平行试验 测定。 6.4 空白试验 除不加试样外,均按上述操作步骤进行。 7 计算结果 结果按式(1)计算: Xi=(ci-c0)×Vi m…………………………(1) 式中: Xi———样品中多环芳烃的含量,单位为毫克每千克(mg/kg); ci———标准曲线计算所得多环芳烃的浓度,单位为毫克每升(mg/L); c0———标准曲线计算所得空白样品中多环芳烃的浓度,单位为