ICS13.310 A92 中华人民共和国国家标准 GB/T29635—2013 疑 似毒品中海洛因的气相色谱、 气相色谱-质谱检验方法 GCandGC-MSexaminationmethodsforheroininsuspecteddrug 2013-07-19发布 2013-11-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会发布前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析标准化分技术委员会(SAC/TC179/SC1)提 出并归口。 本标准起草单位:公安部物证鉴定中心。 本标准主要起草人:高利生、张春水、郑珲、钱振华、徐鹏、黄星、王一、王蔚昕、常颖、刘克林。 ⅠGB/T29635—2013 疑似毒品中海洛因的气相色谱、 气相色谱-质谱检验方法 1 范围 本标准规定了海洛因的气相色谱-质谱(GC-MS)定性分析和气相色谱(GC)定量分析。 本标准适用于毒品案件固体样品中海洛因的定性定量检验鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GA/T122 毒物分析名词术语 JJF1059.1—2012 测量不确定度评定与表示 3 术语和定义 GA/T122界定的术语和定义适用于本文件。 4 原理 本方法采用内标法或外标法进行质量控制,对疑似毒品固体样品中的海洛因进行有机溶剂提取,用 气相色谱-质谱联用(GC-MS)进行定性分析,用气相色谱-氢火焰离子化检测器(GC-FID)对海洛因进行 定量分析。 5 试剂及标准物质、仪器及量器具 5.1 试剂及标准物质 所用试剂均为分析纯,试剂及标准物质包括: a) 氯仿。 b) 甲醇。 c) 提取试剂配制:将氯仿和甲醇以9∶1的比例混合,制备成提取试剂。 d) 可溯源标准物质:海洛因。 e) 外标定量用1.0mg/mL海洛因标准储备液:称取海洛因标准物质(根据标准物质纯度和盐型 换算后等于50.0mg的海洛因),放入50mL容量瓶中,加入20mL提取溶剂振荡溶解后,用 提取溶剂稀释至刻度,配制成1.0mg/mL海洛因标准储备液,置冰箱冷冻保存,保存时间为6 个月。 f) 外标定量用0.1mg/mL海洛因标准工作液:移取1.0mg/mL海洛因标准储备液5mL加入 到50mL容量瓶中,用提取溶剂稀释至刻度,配制成0.1mg/mL海洛因标准工作液,置冰箱 1GB/T29635—2013 中冷藏保存,保存时间为3个月。 g) 外标定量用0.01mg/mL海洛因标准工作液:移取0.1mg/mL海洛因标准工作液1mL加入 到10mL容量瓶中,用提取溶剂稀释至刻度,配制成0.01mg/mL海洛因标准工作液,置冰箱 中冷藏保存,保存时间为1个月。 h) 内标物:苯海拉明或丙基解痉素(SKF525A)。 i) 内标物溶液:称取苯海拉明或SKF525A(根据标准物质纯度换算后等于500.0mg的苯海拉明或 SKF525A),放入50mL容量瓶中,加入约20mL提取溶剂,振摇至样品溶解,超声5min,用提 取溶剂定容至刻度,配制成10mg/mL苯海拉明或SKF525A内标储备液(置于冰箱中保存,保存 时间为12个月)。使用时用提取溶剂逐级稀释到0.1mg/mL。内标物溶液应置于冰箱中保 存,使用前取出放至室温后方可使用,保存时间为2个月。 j) 内标法绘制标准工作曲线用标准工作液:称取海洛因标准物质(根据标准物质纯度和盐型换算 后等于50.0mg的海洛因),放入50mL容量瓶中,加入0.1mg/mL苯海拉明或SKF525A溶液 20mL,振荡溶解后用0.1mg/mL苯海拉明或SKF525A溶液稀释至刻度,配制成1.0mg/mL 海洛因标准溶液,并依次用0.1mg/mL苯海拉明或SKF525A溶液稀释到0.5mg/mL、0.1mg/ mL、0.05mg/mL、0.01mg/mL浓度。 5.2 仪器及量器具 仪器及量器具包括: a) 气相色谱仪,配有火焰离子化检测器(FID); b) 气相色谱-质谱联用仪,配有电子轰击源(EI); c) 高速离心机,最大转速8000r/min; d) 电子天平,实际分度值d=0.01mg; e) 电动振荡器; f) 10mL和1mL移液器或移液管; g) 10mL瓶口移液器。 6 定性分析 6.1 样品制备 样品充分研磨混匀,称取约10mg,加入10mL提取溶剂,密封并振荡10min,离心后取上清液,用 GC-MS分析。如果样品溶液中目标物浓度过低,可适当增加样品称量量2倍~10倍。同时用GC-MS 分析0.002mg/mL的海洛因标准溶液进行质量控制。 6.2 气相色谱-质谱联用仪参考条件 以下为参考条件,可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整: a) 离子源:EI; b) 质量范围:40amu~500amu; c) 采集方式:全扫描(Scan); d) 色谱柱类型:DB-5MS石英玻璃毛细柱(5%苯基+95%聚二甲基硅氧烷)或其他等效柱; e) 色谱柱参数:30m×0.25mm×0.25μm; f) 色谱柱温程:初始温度60℃,以15℃/min升温至280℃,保持15min; g) 进样口温度:280℃; h) 传输线温度:250℃; 2GB/T29635—2013 i) 离子源温度:230℃; j) 分流比:20∶1; k) 载气:高纯氦气(He); l) 柱流量(恒流):1.0mL/min; m) 倍增器电压:参考调谐状况; n) 溶剂切割:3min。 7 定量分析 7.1 外标法 7.1.1 含量范围预分析 预分析的目的在于要对样品中的海洛因含量进行初测,以计算准确定量分析时所用样品的称量质 量,从而保证准确定量时样品溶液中目标物的最终浓度尽可能接近所使用标准工作液的浓度。 称量约10mg样品置于带盖试管中,加入10mL提取溶剂振荡使其溶解,离心后取上清液,用GC- FID分析,采用0.1mg/mL的海洛因标准工作液作为定量参照。 如果样品溶液中目标化合物的浓度过高,可适当减少样品称量质量,或将样品提取液用提取溶剂稀 释后进行分析。 如果样品溶液中目标化合物的浓度过低,可适当增加样品称量质量,或将样品提取液挥干、定容后 进行分析。 按式(1)计算样品中目标组分的含量。 w=C0×A×V1×(V2+V3) A0×V2×m×100%…………………………(1) 式中: w———样品中海洛因的含量,%; C0———标准工作液中海洛因的浓度,单位为毫克每毫升(mg/mL); A———样品溶液中海洛因的色谱峰面积值; V1———样品溶液初次定容体积,单位为毫升(mL); V3———将V2稀释时加入提取溶剂的体积,单位为毫升(mL); A0———标准工作液中海洛因的色谱峰面积值; V2———从V1中移取样品溶液的体积,单位为毫升(mL); m———用于测定的样品的称量质量,单位为毫克(mg)。 7.1.2 准确定量 7.1.2.1 称量质量的计算 根据预分析中海洛因含量测定结果,选择合适的定容体积、稀释倍数(样品提取操作参数选择参见 表A.1),并按式(2)计算出样品称量质量(m)。 m=C0×V×D w×100 …………………………(2) 式中: m———称量质量,单位为毫克(mg); C0———标准工作液中海洛因的浓度,单位为毫克每毫升(mg/mL); V———初次定容体积,单位为毫升(mL); 3GB/T29635—2013 D———稀释倍数; w———样品中海洛因的预分析含量,%。 7.1.2.2 样品提取 根据7.1.2.1计算结果,平行称取样品6份,根据预分析含量范围,加入相应初次定容体积的提取 溶剂。密封并振荡10min。如果样品溶液需要稀释,移取1mL样品提取液至另一试管中,按照稀释倍 数进行稀释定容,离心后取上清液用GC-FID分析。样品提取操作参数选择参见附录A中表A.1。 7.1.2.3 气相色谱仪参考条件 以下为参考条件,按照本法所获得的气相色谱图参见附录B中图B.1,可根据不同品牌仪器和不同 样品等实际情况进行调整: a) 检测器:FID; b) 色谱柱型号:DB-5石英玻璃毛细柱(5%苯基+95%聚二甲基硅氧烷)或其他等效柱; c) 色谱柱参数:30m×0.25mm×0.25μm; d) 色谱柱温程:初始温度180℃,以12℃/min升温至280℃,保持5min; e) 进样口温度:280℃; f) 检测器温度:300℃; g) 载气:高纯氮气(N2); h) 分流比:20∶1; i) 柱流速(恒流):1mL/min; j) 燃烧气:H2; k) 燃烧气流速:按仪器默认值; l) 助燃气:空气; m) 助燃气流速:按仪器默认值。 7.1.2.4 含量计算 按式(1)计算样品中海洛因的含量。 7.2 内标法 7.2.1 标准工作曲线绘制及监测 7.2.1.1 标准工作曲线绘制 采用1.0mg/mL、0.5mg/mL、0.1mg/mL、0.05mg/mL、0.01mg/mL等5个浓度绘制成线性范 围为0.01mg/mL~1.0mg/mL的海洛因标准工作曲线。标准工作曲线应随内标储备液的更换而重 新绘制。 7.2.1.2 标准工作曲线监测 采用5.1j)中浓度为0.05mg/mL和1.0mg/mL的标准物质溶液作为监测样品,建立标准工作曲 线时,每个监测样品各分析10次