ICS65.020.20 B05 中华人民共和国国家标准 GB/T29376—2012 马 铃薯脱毒原原种繁育技术规程 Codeofpracticeforvirusfreeseedpotatoespre-elitebreeding 2012-12-31发布 2013-06-20实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会发布前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国蔬菜标准化技术委员会(SAC/TC467)归口。 本标准起草单位:内蒙古大学内蒙古马铃薯工程技术研究中心、中国标准化研究院、甘肃爱兰马铃 薯种业有限责任公司、国家马铃薯工程技术研究中心、河北省承德大丰马铃薯种业公司、中国检验检疫 科学研究院、百事食品(中国)有限公司、湖南农业大学园艺学院、丽江伯符农业科技发展有限公司、毕节 地区泰丰科技实业有限公司、山西省薯类脱毒中心、云南省农业科学院经济作物研究所、中国农业科学 院蔬菜花卉研究所、四川省农业科学院、云南省农业科学院、山西省农业科学院高寒区作物研究所、西藏 自治区农牧科学院、中国农业科学院农业资源与农业区划研究所。 本标准主要起草人:张若芳、杨丽、周爱兰、孙清华、孙慧生、吴蕾、杜密茹、巩秀峰、王义、宋荣庆、 李冬虎、李明福、赵志强、何长征、熊兴耀、宋文芳、付业春、姬青云、杨琼芬、庞万福、段绍光、刘杰、何卫、 隋启君、杜珍、刘正玉、罗其友。 ⅠGB/T29376—2012 马铃薯脱毒原原种繁育技术规程 1 范围 本标准规定了马铃薯脱毒原原种繁育的技术要求和操作规程。 本标准适用于实验室、温室、防虫网室中马铃薯脱毒原原种的繁育。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB5084 农田灌溉水质标准 GB15618 土壤环境质量标准 GB20464 农作物种子标签通则 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 原原种(G1) pre-elite 用脱毒苗在容器内生产的试管薯或在防虫网室、温室等隔离条件下生产出的符合相应质量标准的 种薯。 3.2 脱毒苗 in-vitrovirusfreeplantlet 经检测确认不带马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯S病毒(PVS)、马铃薯卷叶病 毒(PLRV)、马铃薯M病毒(PVM)、马铃薯A病毒(PVA)和马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)的试 管苗。 3.3 缺陷薯 defectivetuber 有畸形、次生、串薯、龟裂、虫害、冻伤、草穿、黑心、空心、发芽、失水萎蔫、机械损伤等缺陷的马铃薯 块茎。 4 温室、网室要求 4.1 环境要求 4.1.1 进行原原种(G1)种薯生产的温室或网室,应远离马铃薯大田。 4.1.2 应建设在气候冷凉、天然隔离条件好的区域。 4.1.3 周围无污染源,没有其他茄科植物或易引诱蚜虫的黄花作物。 4.1.4 所处地势有利于灌溉和排水。土壤质量应符合GB15618要求;水源充足,能满足生产灌溉要 求,水质符合GB5084要求。 1GB/T29376—2012 4.2 基础设施要求 4.2.1 温室、网室要具有控温、控湿、通风、良好的光照条件,有防雨和防虫设施。温、网室的门窗和通 风口要装孔径0.247mm(60目)的防虫网纱。 4.2.2 温室和网室进门处修建一个缓冲间,应随时消毒灭菌。缓冲间应设置消毒设施,可用生石灰或 其他消毒剂消毒。 4.3 消毒要求 4.3.1 温室及其内部设施应定期消毒。可用硫磺熏蒸、50%多菌灵可湿性粉剂800倍液喷洒或0.1% 高锰酸钾消毒。防虫网室可用50%多菌灵可湿性粉剂800倍液喷洒。 4.3.2 应对所用工具(剪刀、刀片、培养皿等)高温灭菌或用0.5%高锰酸钾溶液浸泡。 4.3.3 工作人员应穿洁净的工作服,用肥皂洗手,工作场所禁止吸烟。 5 试管薯繁育 5.1 待脱毒试管苗茎段腋芽处长出6片~8片叶的小苗后,在无菌操作条件下转接到诱导结薯培养基 (配方参见附录A)上,诱导结薯。 5.2 置于18℃~20℃,16h/d黑暗条件或24h黑暗条件下培养。 5.3 两周后,植株上陆续形成小块茎,5周~6周后可收获。 6 基质原原种繁育 6.1 苗床的准备 6.1.1 苗床大小和形式可根据温室、网室大小自行确定。 6.1.2 苗池底部铺一层园艺地布或悬空与土壤隔离。 6.1.3 苗床用杀菌剂和杀虫剂处理。 6.2 基质的准备 在苗床上可铺一层10cm左右的蛭石或珍珠岩等消毒基质;或先在苗床上铺一层5cm厚的无病虫 的营养消毒基质,再铺5cm厚度蛭石或珍珠岩等消毒基质。浇透水,待含水量达到60%~70%时,准 备栽苗。 6.3 生根和炼苗 6.3.1 脱毒苗生根 将脱毒苗切成带有1个芽的茎段,接入生根培养基。光照16h/d,25℃培养待小苗长成带有4个~ 5个叶片及3条~4条小根的健壮苗。 6.3.2 炼苗 将培养容器从培养室移到温室自然光、温条件下,揭启封口炼苗。温室地表洒水湿润,温度18℃~ 25℃。在中午强光照下要用遮阳网遮荫,炼苗时间7d左右。 6.4 移栽 6.4.1 将炼苗后的脱毒苗取出,洗去培养基,去掉老根,扦插于育苗池或育苗盘基质中。 2GB/T29376—2012 6.4.2 每平方米200株~250株。移栽时使根系与基质充分接触,及时喷水。 6.5 苗期管理 6.5.1 脱毒苗移栽后应覆盖塑料薄膜及遮阳网纱,缓苗后逐渐去掉薄膜及遮阳网纱。 6.5.2 在自然光照条件下,控制温度在20℃左右、通过定时雾化处理,保持相对湿度在95%~100%。 若使用扦插苗,剪下扦插苗用生根粉处理。扦插前要将苗床浇透,缓苗期不浇水。扦插后遮荫 10d~15d。 6.5.3 缓苗后,幼苗长出新根。保持基质湿度60%~70%。根据植株营养状况,喷施水或营养液,根 据苗情适当通风。 6.5.4 定植30d后,可用0.2%磷酸二氢钾溶液或0.2%尿素溶液交替喷施。 6.5.5 温、湿度应根据不同生育阶段的需要采取覆盖遮阳网、保温、通风等措施进行调节。光照为自 然光。 6.6 结薯期管理 6.6.1 匍匐茎已经开始膨大时,基质最大持水量控制在75%~80%左右,温度17℃~25℃。 6.6.2 结合施肥培高基质。 6.7 病虫草害防控 6.7.1 生产过程中应全程进行病虫草害防治。 6.7.2 采取必要措施防虫、防雨,基质与土壤隔离,灌溉水符合GB5084。 6.7.3 在各品种现蕾至盛花期,根据品种特征特性拔除混杂植株,全生育期随时检查,及时拔除病株 杂株。 6.7.4 清除温室或网棚内外杂草。 6.7.5 缓苗后每周喷一次杀菌剂和杀虫剂,应交替使用。 6.8 收获 6.8.1 收获前7d~10d内停止浇水。 6.8.2 适时收获。定植后早熟品种70d左右收获,中晚熟品种90d左右收获。 7 雾培原原种繁育 7.1 雾化栽培设施 雾化栽培设施是由培养槽、水泵、雾化装置、输液管道、控时单元和贮液箱等组成(图1)。培养槽材 质应具有良好的保温性,一般长×宽×深为350cm×60cm×24cm(也可根据温室空间变动),槽上盖 板开有定植孔,槽底安装双向折射雾化喷头,输液管道选用ABS耐酸碱塑材,控时单元为可编程控制器 (利用编程器将程序输入),根据脱毒苗不同生长阶段,可在3min~2h范围内,接通喷雾30s~60s,其 余时间断开,营养液昼夜循环,贮液箱为半地下式,利于营养液回流和循环。 3GB/T29376—2012 图1 雾化栽培设施图 7.2 营养液 雾培营养液配方参见附录B。 7.3 定植 7.3.1 根据当地气候条件,确定定植时期。 7.3.2 定植前,采用壮苗培养基培养20d~25d,待苗高10cm~15cm时准备定植。 7.3.3 定植前,在培养槽的盖板上先盖上黑色塑料膜,然后按要求的行株距事先在盖板上开好定植孔 (直径1.5cm)。 7.3.4 早熟品种的脱毒苗行株距为15cm×10cm;中晚熟品种的脱毒苗为20cm×15cm。 7.3.5 将准备好的脱毒苗栽于盖板的定植孔内,用充分吸水的海绵将苗固定。 7.3.6 槽内覆盖黑色膜保持黑暗,营造适合匍匐茎生长和顶端膨大成薯的环境。 7.4 雾培管理 7.4.1 营养液检测 营养液在循环利用过程中,隔天用电导率仪检测,使营养液的电导率(EC)值的范围保持在 2800μS/cm~3400μS/cm。同时利用酸度计检测营养液的pH,使其达到最佳范围pH5.5~6.0。如 pH过高,可用1mol/L硝酸溶液调节;大规模生产可用浓硝酸调节。 7.4.2 喷雾时间 栽苗7d~10d内为发出新根阶段,此时根系吸水能力很弱,为防止脱毒苗失水萎蔫,应缩短停喷 时间,即喷30s,停3min;植株根系发达后,大量的根系持水能力较强,可逐渐延长停喷时间,高温和晴 朗天气,5min~30min时段内喷雾30s~40s,其余时间停喷。夜间和阴雨天6min~1h时段内喷雾 20s,其余时间停喷。 7.4.3 温、湿度管理 整个生长过程,空气相对湿度控制在55%~65%之间。定植时,苗期温度控制在10℃~15℃之 间;茎叶生长期至现蕾期温度控制在20℃~28℃之间;开花期匍匐茎开始生长,温度控制在18℃~ 22℃之间;喷雾时水温控制在10℃~20℃之间。 4GB/T29376—2012 7.5 结薯 脱毒苗定植后20d左右,开始发生匍匐茎,为促使多发匍匐茎