ICS65.120 B46 中华人民共和国国家标准 GB/T28643—2012 饲 料中二英及二英类多氯联苯的测定 同位素稀释-高分辨气相色谱/高分辨 质谱法 DeterminationofPCDD/Fsanddioxin-likePCBsinfeeds— IsotopedilutionHRGC/HRMS 2012-07-31发布 2012-11-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会发布前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准主要参考了美国环境规划署(USEPA)颁布的1613B(Tetra-throughocta-chlorinateddiox- insandfuransbyisotopedilutionHRGC/HRMS,1997)和1668A(Chlorinatedbiphenylcongenersin water,soil,sediment,andtissuebyHRGC/HRMS,1999)方法,以及《欧盟关于饲料的分类及其中二 英和二英类多氯联苯的限量标准》(Directive2002/32/EC,lastamendedin3February2006)文件。 油脂类样品中二英和二英类多氯联苯的测定参考GB/T5009.205—2007《食品中二英及其类似 物毒性当量的测定》。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC76)归口。 本标准起草单位:中国科学院生态环境研究中心、中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 [国家饲料质量监督检验中心(北京)]、国家环境分析测试中心、中国科学院大连化学物理研究所。 本标准主要起草人:张庆华、杨曙明、刘爱民、倪余文、王璞、李兰、贾铮、李英明。 ⅠGB/T28643—2012 饲料中二英及二英类多氯联苯的测定 同位素稀释-高分辨气相色谱/高分辨 质谱法 1 范围 本标准规定了用同位素稀释-高分辨气相色谱/高分辨质谱法测定饲料中17种2,3,7,8-氯取代的 多氯代二苯并二英(PCDDs)和多氯代二苯并呋喃(PCDFs)(以下简称PCDD/Fs)以及12种二英类 多氯联苯(DL-PCBs)(见表A.1和表A.2)的方法。 本标准适用于饲料原料、配合饲料、浓缩饲料、精料补充料、添加剂预混合饲料以及饲料添加剂。 本标准方法分析饲料中PCDD/Fs和DL-PCBs的检测限见表B.1。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T5009.205—2007食品中二英及其类似物毒性当量的测定 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T8170 数值修约规则与极限数值的表示和判定 GB/T14699.1 饲料 采样 GB/T20195 动物饲料 试样的制备 3 原理 应用加速溶剂提取和索氏提取等技术提取样品中的PCDD/Fs和DL-PCBs,提取液经过复合硅胶 柱、碱性氧化铝柱等填装色谱柱净化、浓缩后,用高分辨气相色谱/高分辨质谱进行分析检测,同位素稀 释法定量;根据各目标化合物的毒性当量因子(TEF)与所测得含量相乘后累加,计算样品中PCDD/Fs 和DL-PCBs的毒性当量(TEQ)。 4 试剂和材料 除非另有规定,在分析中均使用农残级(pesticideresidue)试剂和符合GB/T6682规定的一级 用水。 4.1 正己烷。 4.2 二氯甲烷。 4.3 甲苯。 4.4 壬烷。 4.5 浓硫酸(优级纯)。 4.6 氢氧化钠(优级纯)。 1GB/T28643—2012 4.7 标准溶液。 4.7.1 PCDD/Fs同位素标记定量内标标准溶液:PCDD/Fs的同位素标记定量内标溶液浓度见表 C.1,分析测试中可直接使用,无需稀释。 4.7.2 PCDD/Fs同位素标记的回收率内标标准溶液:PCDD/Fs的同位素标记回收率内标溶液 (13C-1,2,3,4-TCDD和13C-1,2,3,7,8,9-HxCDD)浓度见表C.2,分析测试中可直接使用。 4.7.3 PCDD/Fs精密度和回收率检查标准溶液(PAR):用壬烷配制的含天然PCDD/Fs溶液(见 表C.3),用于检测过程中精密度和回收率试验(OPR)。 4.7.4 PCDD/Fs校正标准溶液:为含有天然和同位素标记的PCDD/Fs系列校正溶液(见表C.4)。测 定校正标准溶液,可以获得天然与同位素标记PCDD/Fs的相对响应因子(RRF)。CS3可用于已建立 RRF的日常校正和校正曲线校验;CS1可用于检查HRGC/HRMS应具备的灵敏度。 4.7.5 DL-PCBs同位素标记定量内标标准溶液:DL-PCBs的同位素标记定量内标溶液浓度见表C.5。 分析测试中应稀释后使用。 4.7.6 DL-PCBs同位素标记的回收率内标标准溶液:DL-PCBs的同位素标记回收率内标溶液浓度见 表C.6。分析测试中应稀释后使用。 4.7.7 DL-PCBs精密度和回收率检查标准溶液(PAR):用壬烷配制的含天然DL-PCBs溶液(见 表C.7),用于检测过程中精密度和回收率试验(OPR)。 4.7.8 DL-PCBs校正标准溶液:为含有天然和同位素标记的DL-PCBs系列校正溶液(见表C.8)。其中 CS3可用于已建立RRF的日常校正和校正曲线校验,CS1可用于检查HRGC/HRMS应具备的灵敏度。 4.8 硅胶。 4.8.1 活性硅胶:使用前在550℃下活化12h,于干燥器中密封保存,1个月内使用。 4.8.2 酸性硅胶(质量分数为40%):称取60g活性硅胶(4.8.1)于烧瓶中,用滴管逐滴加入40g浓硫 酸(4.5)并不断摇动使其较均匀混合,再将烧瓶加塞后固定于摇床上进行振荡,直至硅胶呈均匀流动状 态,密封保存于干燥器中,1个月内使用。 4.8.3 酸性硅胶(质量分数为30%):称取70g活性硅胶(4.8.1)于烧瓶中,用滴管逐滴加入30g浓硫 酸(4.5)并不断摇动使其较均匀混合,再将烧瓶加塞后固定于摇床上进行振荡,直至硅胶呈均匀流动状 态,密封保存于干燥器中,1个月内使用。 4.8.4 碱性硅胶:称取100g活性硅胶(4.8.1)于烧瓶中,称取1.2g氢氧化钠(4.6)于烧杯中,并加入 30mL水,混匀后用滴管逐滴加入到硅胶中,再将烧瓶加塞后振荡至硅胶呈均匀流动状态,密封保存于 干燥器中,1个月内使用。 4.9 碱性氧化铝:使用前在600℃下活化24h。于干燥器中密封保存,1个月内使用。 4.10 弗罗里土:60目~100目,使用前在140℃下烘烤至少7h,取出后1h内使用。 4.11 活性炭(质量分数为18%): 活性炭:CarbopackC,Supelco102581),或其他等同类型。 分散剂:Celite545coarse,Fluka221401),或其他等同类型。 称取9.0gCarbopackC和41.0gCelite545coarse充分混和,在130℃下活化至少6h,于干燥器 中密封保存,1个月内使用。 4.12 无水硫酸钠:在660℃下灼烧至少6h,于干燥器中密封保存,1个月内使用。 5 仪器与设备 实验室常用仪器设备及以下设备: 1) 给出这一信息是为了方便本标准的使用者,并不表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果,则 可使用这些等效产品。5.1 高分辨气相色谱/高分辨质谱仪(HRGC/HRMS)。 2GB/T28643—2012 5.2 旋转蒸发器。 5.3 氮气浓缩器。 5.4 超声波清洗器。 5.5 振荡器(摇床)。 5.6 加速溶剂提取仪,压力:10.3MPa(1500psi)~13.7MPa(2000psi),温度:100℃~200℃。 5.7 天平:感量0.01g;0.1mg。 5.8 烘箱:能够在105℃~250℃范围内保持恒温(±5℃)。 5.9 马弗炉:能够在200℃~700℃范围内保持恒温(±10℃)。 5.10 玻璃层析柱:带聚四氟乙烯柱塞,底部装有砂芯,150mm×8mm(内径),300mm×15mm (内径)。 5.11 自动凝胶渗透色谱(GPC):净化柱(内径15mm~20mm),内装70gS-X3凝胶(200目~ 400目)。 6 采样和试样制备 按GB/T14699.1进行样品采集;按GB/T20195制备试样,过0.28mm孔筛。 7 分析步骤 7.1 提取 7.1.1 饲料原料、配合饲料、浓缩饲料、精料补充料、添加剂预混合饲料和饲料添加剂(提供铜源的饲料 添加剂及其预混合饲料除外)的提取 样品的提取采用加速溶剂提取法。称取样品10.0g(准确至0.01g),与10g无水硫酸钠(4.12)混 合均匀,转移至加速溶剂提取仪(5.6)的不锈钢萃取池中,分别加入PCDD/Fs和DL-PCBs的13C标记 定量内标(4.7.1和4.7.5),进行提取。 提取条件: a) 提取溶剂:正己烷(4.1)∶二氯甲烷(4.2)=1∶1(体积比),100mL; b) 压力:10.3MPa(1500psi); c) 温度:120℃; d) 加热时间:7min;静态提取时间:8min;吹扫时间:2min; e) 循环3次; f) 样品收集于250mL接收瓶中。 也可采用其他等效的提取方法。 7.1.2 提供铜源的饲料添加剂及其预混合饲料的提取 样品提取采用索氏提取法。称取样品20.0g(准确至0.01g),与10g无水硫酸钠(4.12)混合均 匀,转移至