ICS65.020 B32 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3030—2016 棉花中水溶性总糖含量的测定 葱酮比色法 Determination of total water-soluble sugars in cotton- anthronecolorimetry 行业标准信息服务平台 2016-12-23发布 2017-04-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T3030—2016 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由农业部种植业管理司提出并归口。 量技术监督局。 本标准主要起草人：王延琴、杨伟华唐淑荣、周大 、匡猛、马磊、蒙忠民、王星军、孟俊婷、方丹、韦 京艳、徐双娇、周关印。 PUB 服务平台 NY/T3030—2016 棉花中水溶性总糖含量的测定 葱酮比色法 1范围 本标准规定了棉花中水溶性总糖含量测定的葱酮比色法。 本标准适用于棉花中水溶性总糖含量的测定。 本标准方法的线性范围为0mg/mL~0.1mg/mL。 本标准方法的定量限为0.003mg/mL。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6097棉纤维试验取样方法 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 棉花中的水溶性糖在浓硫酸存在下与蒽酮发生显色反应，产生蓝绿色化合物，在波长575nm处测 定吸光度，吸光度值与总糖含量成正比，根据标准工作曲线所得的回归方程，计算出糖含量。 4试剂和材料 除非另有说明，仅使用分析纯试剂，水为GB/T6682规定的三级水。 4.1硫酸（H2SO）：密度1.84g/mL。 4.2葡萄糖标准品（CH12O）：含量大于99.5%。 4.3葡萄糖标准溶液Lo（C,Hi2O）=1mg/mL]：称取葡萄糖标准品0.01g（精确到0.1mg），加少量水 溶解并稀释定容至100mL。 4.4硫酸一葱酮指示剂：称取0.2g葱酮（精确到1mg)，加100mL浓硫酸溶解，现用现配。 5仪器 5.1分光光度计。 5.2分析天平：感量士0.0001g、感量土±0.001 5.3恒温水浴振荡器。 6取样 6.1取样步骤 6.1.1按GB/T6097的规定抽取实验室样品，风干，放入聚乙烯塑料包装袋内密封。 6.1.2从实验室样品中随机抽取不少于150g的试验样品，将其中的非棉纤维去除，充分混匀 7试样的制备 称取1g试样（精确到0.001g）3份，分别置于100mL具塞容器中，加水50mL，用玻璃棒反复挤压 至棉纤维完全浸湿，盖紧容器盖，沸水浴中震荡加热60min，取出冷却后加0.1g活性炭，摇匀，脱色 NY/T3030—2016 30min后过滤，加水定容至50mL备用。 8分析步骤 8.1标准曲线的制订 分别吸取0mL0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL葡萄糖标准溶液（4.3）至50ml 容量瓶中用水定容至刻度，摇匀。浓度分别为0μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、 80μg/mL、100μg/mL。准确吸取上述标准葡萄糖溶液1mL加人10mL具塞比色管中，每一试管加人 5mL硫酸一葱酮指试剂（4.4）.盖盖震荡，使之完全混合 在沸水中震荡加热10min，取出后于自来水 中冷却。20min后，在分光光度计上，以含葡萄糖0ml的试管作对照，在波长575nm处测定吸光度 值。以葡萄糖含量为横坐标、吸光度值为纵坐标 制标准曲线，或计算回归方程。 可溶性总糖以葡萄糖（C (1) 式中： 可溶性总精浓度 RES A- 一吸光度值 8.2测定 准确吸取1mL试 0mL具塞式营中加 5ml硫酸 酮指试 震荡 ，使之完全 混合。在沸水浴 10m 在自来水中冷和至室温 中加 在波长57 定 容液的吸光 ARCH 度。根据标准曲 计算相应的糖浓度 9 结果计算 含糖量按式（2） ......(2) 式中： M 试样含糖 为毫克 试样质 m 取3次测定结果 的 为测定结果.计算结果保留小数点后两位 10精密度 本标准方法的重复性标准偏差（s）为 服务平台 2 NY/T3030—2016 30min后过滤，加水定容至50mL备用。 8分析步骤 8.1标准曲线的制订 分别吸取0mL0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL葡萄糖标准溶液（4.3）至50ml 容量瓶中用水定容至刻度，摇匀。浓度分别为0μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、 80μg/mL、100μg/mL。准确吸取上述标准葡萄糖溶液1mL加人10mL具塞比色管中，每一试管加人 5mL硫酸一葱酮指试剂（4.4）.盖盖震荡，使之完全混合 在沸水中震荡加热10min，取出后于自来水 中冷却。20min后，在分光光度计上，以含葡萄糖0ml的试管作对照，在波长575nm处测定吸光度 值。以葡萄糖含量为横坐标、吸光度值为纵坐标 制标准曲线，或计算回归方程。 可溶性总糖以葡萄糖（C (1) 式中： 可溶性总精浓度 RES A- 一吸光度值 8.2测定 准确吸取1mL试 0mL具塞式营中加 5ml硫酸 酮指试 震荡 ，使之完全 混合。在沸水浴 10m 在自来水中冷和至室温 中加 在波长57 定 容液的吸光 ARCH 度。根据标准曲 计算相应的糖浓度 9 结果计算 含糖量按式（2） ......(2) 式中： M 试样含糖 为毫克 试样质 m 取3次测定结果 的 为测定结果.计算结果保留小数点后两位 10精密度 本标准方法的重复性标准偏差（s）为 服务平台 2 NY/T3030—2016 30min后过滤，加水定容至50mL备用。 8分析步骤 8.1标准曲线的制订 分别吸取0mL0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL葡萄糖标准溶液（4.3）至50ml 容量瓶中用水定容至刻度，摇匀。浓度分别为0μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、 80μg/mL、100μg/mL。准确吸取上述标准葡萄糖溶液1mL加人10mL具塞比色管中，每一试管加人 5mL硫酸一葱酮指试剂（4.4）.盖盖震荡，使之完全混合 在沸水中震荡加热10min，取出后于自来水 中冷却。20min后，在分光光度计上，以含葡萄糖0ml的试管作对照，在波长575nm处测定吸光度 值。以葡萄糖含量为横坐标、吸光度值为纵坐标 制标准曲线，或计算回归方程。 可溶性总糖以葡萄糖（C (1) 式中： 可溶性总精浓度 RES A- 一吸光度值 8.2测定 准确吸取1mL试 0mL具塞式营中加 5ml硫酸 酮指试 震荡 ，使之完全 混合。在沸水浴 10m 在自来水中冷和至室温 中加 在波长57 定 容液的吸光 ARCH 度。根据标准曲 计算相应的糖浓度 9 结果计算 含糖量按式（2） ......(2) 式中： M 试样含糖 为毫克 试样质 m 取3次测定结果 的 为测定结果.计算结果保留小数点后两位 10精密度 本标准方法的重复性标准偏差（s）为 服务平台 2 NY/T3030—2016 30min后过滤，加水定容至50mL备用。 8分析步骤 8.1标准曲线的制订 分别吸取0mL0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL葡萄糖标准溶液（4.3）至50ml 容量瓶中用水定容至刻度，摇匀。浓度分别为0μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、 80μg/mL、100μg/mL。准确吸取上述标准葡萄糖溶液1mL加人10mL具塞比色管中，每一试管加人 5mL硫酸一葱酮指试剂（4.4）.盖盖震荡，使之完全混合 在沸水中震荡加热10min，取出后于自来水 中冷却。20min后，在分光光度计上，以含葡萄糖0ml的试管作对照，在波长575nm处测定吸光度 值。以葡萄糖含量为横坐标、吸光度值为纵坐标 制标准曲线，或计算回归方程。 可溶性总糖以葡萄糖（C (1) 式中： 可溶性总精浓度 RES A- 一吸光度值 8.2测定 准确吸取1mL试 0mL具塞式营中加 5ml硫酸 酮指试 震荡 ，使之完全 混合。在沸水浴 10m 在自来水中冷和至室温 中加 在波长57 定 容液的吸光 ARCH 度。根据标准曲 计算相应的糖浓度 9 结果计算 含糖量按式（2） ......(2) 式中： M 试样含糖 为毫克 试样质 m 取3次测定结果 的 为测定结果.计算结果保留小数点后两位 10精密度 本标准方法的重复性标准偏差（s）为 服务平台 2