43 湖南省地方标准 ICS CCS 65.020 B 16 发 布 湖南省市场监督管理局2021-11发布-09 2022-01实施-09DB43/T2224—2021 规模猪场非洲猪瘟监测样品采集 及检测技术规程 Technical specification for monitoring sample collection and detection of African swine fever in large scale pig farms DB43/T 2224—2021 I 目 次 前言 ································ ································ ································ ························ Ⅲ 1 范围 ································ ································ ································ ····················· 1 2 规范性引用文件 ································ ································ ································ ······ 1 3 术语和定义 ································ ································ ································ ············ 1 4 要求 ································ ································ ································ ····················· 1 5 样品采集 ································ ································ ································ ··············· 2 6 样品包装与运输 ································ ································ ································ ······ 3 7 检测 ································ ································ ································ ····················· 3 8 阳性结果处置 ································ ································ ································ ········· 3 9 废弃物处理 ································ ································ ································ ············ 4 10 档案记录 ································ ································ ································ ·············· 4 附录A（资料性） 非洲猪瘟环境样品采样位置与数量表 ································ ····················· 5 附录B（资料性） 非洲猪瘟监测样品采样记录表 ································ ······························ 6 DB43/T 2224—2021 II DB43/T 2224—2021 III 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草。 请注意本文件的某些内 容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由湖南省农业农村厅提出。 本文件由湖南省农业标准化技术委员会归口。 本文件起草单位：湖南省畜牧兽医研究所、湖南鑫广安农牧股份有限公司、怀化市畜牧水产事务中 心、安仁县旺峰养殖专业合作社。 本文件主要起草人：杨俊、王慧、刘伯承、杜丽飞、宋武、周望平、杨爱梅、洪蕾、江新明、刘俊 琦、蒋战波、冯小花、陈一峰、彭苗苗、聂后福、袁旭鹏。 DB43/T 2224—2021 IV DB43/T 2224—2021 1 规模猪场非洲猪瘟监测样品采集及检 测技术规程 1 范围 本文件规定了规模猪场非洲猪瘟监测样品采集及检测技术 的术语和定义、要求、样品采集、样品包 装与运输、检测、阳性结果处置、废弃物处理和档案记录等要求。 本文件适用于湖南省规模猪场非洲猪瘟监测样品的采集和检测。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB∕T 18648 非洲猪瘟诊断技术 GB 19489 实验室生物安全通用要求 NY/T 541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 NY/T 1948 兽医实验室生物安全要求通则 DB43/T 1670 非洲猪瘟病毒检测免核酸提取荧光 PCR 法 高致病性动物病原微生物菌（毒）种或者样本运输包装规范（农业部公告 第503号） 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 监测样品（ monitoring sample ） 取自生猪或环境，拟通过检测反映个体、群体或环境有关状况的材料或物料。 4 要求 4.1 采样原则 4.1.1 发生急性死亡的生猪疑为炭疽时不得解剖，应按 NY/T 541 的规定采血涂片镜检，排除炭疽后方 可采样。 4.1.2 采集死亡动物的病料以及动物活体采样时，应符合动物伦理的相关规定，动物扑杀应符合动物 福利。 4.1.3 做好环境消毒，动物组织及采样废弃物的无害化处理，避免污染环境，防止疫病扩散传播。 4.2 无菌操作 采样过程应注意无菌操作，采样所需刀、剪、镊子、离心管、封口袋、 PBS或生理盐水等采样用品 DB43/T 2224—2021 2 应事先严格灭菌，每种样品应单独采集、盛放。 4.3 安全防护 4.3.1 采样人员应做好个人防护，严格遵守生物安全操作的相关规定。人员要求应符合 NY/T 541 中的 相关要求。 4.3.2 无生物安全防护及消毒措施保 障情况下，不得对疑似非洲猪瘟病死猪进行剖检。 4.4 检测实验室资质 开展非洲猪瘟检测的实验室应符合非洲猪瘟检测实验室技术要求， 并取得省级兽医行政主管部门审 定的非洲猪瘟 检测实验资 质。 5 样品采集 5.1 采样前准备 5.1.1 制定采样方案 猪场应根据采样目的、风险点、疫情等情况制定采样方案，确定样品采集的种类、数量、部位与采 样方法等。 5.1.2 采样人员准备 采样人员经洗手消毒，穿戴好一次性手套、防护服、口罩、鞋套后，带上采样所需物品到达洗消点。 5.1.3 采样物品准备 棉签、装有 PBS的离心管 、真空采血管、记号笔、剪刀、镊子、 75%酒精棉、密封袋、样品箱、冰 袋等,可根据实际操作的需要增加采样物品。 5.2 样品种类 5.2.1 常规监测 主要采集全血或鼻液（唾液）拭子样品，环境采集拭子样品。 5.2.2 紧急监测 对发生非洲猪瘟疫情猪场进行感染评估、精准剔除时，应根据猪场感染实际，确定采样单元和采样 数量，对猪群主要采样鼻液（唾液）拭子样品及全血样品，对环境采集拭子样品。 5.2.3 诊断监测 对疑似非洲猪瘟进行诊断时，应选择症状典型或有患病征兆的猪，采集鼻液（唾液）拭子、血液和 组织等样品。 5.2.4 引种监测 对于引进的猪，严格执行隔离与检测，所有猪只均需采集鼻液（唾液）拭子和血样。 5.2.5 复养场评估监测