ICS 67.060 x 04 GR 中华人民共和国国家标准 GB/T 23817—2009 大豆中磺酰脲类除草剂残留量的测定 Method for determination of sulfonylurea herbicide residues in soybean 2009-05-25发布 2009-09-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 23817—2009 前言 本标准的附录 A、附录 B和附录 C均为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院 本标准主要起草人：陈冬东、李淑娟、祁彦、李建中、安娟、张新忠、杨强、占春瑞、李晓娟、储晓刚。 GB/T23817—2009 大豆中磺酰脲类除草剂残留量的测定 1范围 本标准规定了大豆产品中环氧嘧磺隆、噻盼磺隆、甲磺隆、醚苯磺隆、氯磺隆、苄嘧磺隆、氟磺隆、吡 密磺隆、氯嘧磺隆、氟嘧磺隆残留量的高效液相色谱和液相色谱-质谱/质谱的测定方法 本标准适用于大豆中环氧嘧磺隆、噻磺隆、甲磺隆、醚苯磺隆、氯磺隆、嘧磺隆、氟磺隆、吡嘧磺 隆、氯嘧磺隆、氟嘧磺隆残留量的检测及确证。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T6682分析试验室用水规格和试验方法（GB/T6682—2008，ISO3696：1987，MOD） 3原理 试样中磺酰脲类除草剂用乙提取，经氟罗里硅土柱净化后，用高效液相色谱和液相色谱-质谱/质 谱测定，外标法定量。 4试剂和材料 除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1乙腈：色谱纯。 4.2甲醇。 4.3丙酮。 4.4二氯甲烷。 4.5正已烷。 4.6甲酸。 4.7氟罗里硅土：60mm~100mm，650℃烘4h，降至室温后，称取95g氟罗里硅土加人5g水，配制 4.8无水硫酸钠：650℃灼烧4h，冷却后置于干燥器中存放备用。 4.9二氯甲烷-丙酮-甲醇（7.5+2+0.5，体积比）：量取7.5mL二氯甲烷、2mL丙酮和0.5mL甲醇， 混匀。 4.11滤膜:0.22μm。 4.12标准品：环氧嘧磺隆、噻盼磺隆、甲磺隆、醚苯磺隆、氯磺隆、苄嘧磺隆、氟磺隆、吡嘧磺隆、氯嘧磺 隆、氟嘧磺隆，纯度均天于98%，相关信息参见附录A中表A1。 4.13标准储备液：准确称取适量的10种磺酰脲标准品，用乙睛分别配制成浓度为100ug/mL的标准 储备液。 4.14混合标准工作液：根据需要，分别吸取10种磺酰脲标准储备液用乙睛稀释配制成适当浓度的混 合标准工作液 1 GB/T238172009 5仪器和设备 5.1高效液相色谱仪（HPLC)：配有二极管阵列检测器。 5.2液相色谱-质谱质谱仪（LC-MS/MS）：配有电喷雾离子源（ESI）。 5.3均质器。 5.4玻璃净化柱：300mmX10mm（内径）玻璃层析柱，依次填人2cm无水硫酸钠，2.5g的5%氟罗里 硅土，2cm高的无水硫酸钠。使用前用20mL二氯甲烷活化。 5.5振荡器。 5.6离心机。 5.7旋转蒸发仪。 5.8聚四氟乙烯离心管。 6试样制备与保存 6.1试样制备 取代表性试样500g，用粉碎机粉碎并使其全部通过0.425mm的样品筛，混和均匀，装人洁净的容 器内，密封并标识。 6.2试样保存 试样于0℃～4℃避光保存。取样、制样及保存过程中应防止试样受到污染或者残留农药含量发 生变化。 7分析步骤 7.1提取 称取5g试样（精确至0.01g）于50mL聚四氟乙烯离心管中，加人30mL乙睛于振荡器提取 20min，4000r/min离心5min，将上清液转入150mL分液漏斗中。再向残渣中加入30mL乙睛重复 上述操作一次，合并两次提取液于分液漏斗中。向分液漏斗中加人30mL用乙睛饱和的正已烷，振摇 2min，静置分层后弃去正已烷层，乙腈层转于100mL梨形瓶中40℃旋转浓缩蒸发至干，用5mL二氯 甲烷溶解残渣， 7.2净化 将上述提取液全部转移至柱上。用10mL二氯甲烷-丙酮-甲醇（7.5十2十0.5，体积比）（4.9）淋洗 柱子并弃去，再用20mL二氯甲烷-甲醇（1十1，体积比）（4.10）进行洗脱并收集于梨形瓶中。洗脱液于 旋转蒸发器40℃下浓缩至干，用1mL流动相溶解定容。过0.22μm滤膜，供HPLC和LC-MS/MS 测定。 7.3测定 7.3.1HPLC参考条件 色谱柱：Cls，250mm×4.6mm（内径），5μm，或相当者； b) 流动相：乙-水（磷酸调pH=2.5），梯度条件参见附录B中表B.1； c) 流速：1.0mL/min; d) 检测波长：230nm； 进样量：10μL； 柱温：30℃。 LC-MS/MS参考条件 7.3.2 a) 色谱柱：Cis，150mm×2.1mm（内径），5μm，或相当者； b) 流动相：乙腈-0.1%甲酸水溶液，梯度条件参见附录B中表B.2； 2 GB/T23817—2009 流速：0.2mL/min； d) 进样量：10μL； e) 柱温：30℃。 f）质谱条件：参见附录B中表B.3和表B.4。 7.3.3定量测定 的响应值应在仪器检测的线性范围内。对标准工作溶液及样液等体积参插进样测定。在上述HPLC 仪器条件下，参考保留时间分别为：环氧嘧磺隆10.74min，噻吩磺隆11.25min，甲磺隆12.30min，醚 苯磺隆13.59min，氯磺隆14.11min，苄嘧磺隆17.35min，氟磺隆19.15min，吡嘧磺隆19.33min，氯 嘧磺隆19.84min，氟嘧磺隆20.89min。液相色谱图参见附录C中图C.1。 7.3.3.2LC-MS/MS法：根据样液中磺酰脲类的含量，选定浓度相近的标准工作液，待测样液中某种 磺酰脲的响应值应在仪器检测的线性范围内。对标准工作液及样液等体积参插进样测定。在上述仪器 条件下，参考保留时间分别为：环氧嘧磺隆5.49min，噻吩磺隆5.63min，甲磺隆6.15min，醚苯磺隆 6.63min，氯磺隆6.86min，芋嘧磺隆8.46min，氟磺隆9.49min，吡嘧磺隆9.91min，氯嘧磺隆 9.91min，氟嘧磺隆10.46min。液相色谱-质谱/质谱色谱图参见附录C中图C.2。 7.3.4定性测定 土2.5%的允许偏差之内；样品中待测组分的两个子离子的相对丰度与浓度相当的标准溶液相比，相对 丰度偏差不超过表1的规定，则可判断样品中存在相应的目标化合物。 表1定性测定时相对离子丰度的最大充许偏差 相对离子丰度/% >50 >20~50 >10~20 <10 允许的相对偏差/% ±20 ±25 ±30 ±50 7.4空白试验 除不加试样外，按上述测定步骤进行。 8结果计算和表达 试样中待测化合物的残留量可以采用测定仪器的软件处理器或者按式（1）计算： AXcXV X= (I)... A.Xm 式中： X一试样中被测组分的残留含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； A——样液中被测组分的峰面积； A。—标准工作液中被测组分的峰面积； c———标准工作液中被测组分的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； V样液最终定容体积，单位为毫升（mL）； m——最终样液所代表的试样量，单位为克（g）。 注：计算结果需将空白值扣除。 9测定低限和回收率 9.1测定低限 本标准液相色谱法对各待测物的测定低限为0.02mg/kg；液相色谱-质谱/质谱法对各待测物的测 定低限为0.005mg/kg。 3